RFC5 Knockout HEK293T RIPA Lysate(RFC5基因敲除HEK293T细胞RIPA裂解液)是通过同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因并实现了目的基因CRISPR敲除的多克隆HEK293T细胞的RIPA裂解液。该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。本产品可用于该目的基因敲除后其信号通路相关蛋白的研究，也可以用于该基因相应抗体的验证。
本RIPA裂解液源于可同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因的慢病毒感染HEK293T细胞并经过puromycin筛选后获得的多克隆细胞。制备该细胞的相应慢病毒的基因序列的关键图谱信息请参考图1。
图1. 可同时表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的慢病毒其基因序列的关键图谱信息。
该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。
由于本细胞是通过CRISPR/Cas9技术获得的多克隆细胞，基于CRISPR/Cas9技术的特点，理论上平均有2/3的细胞发生移码突变而导致了目的基因的敲除，平均有1/3的细胞并未发生移码突变。很多情况下有约2/3的细胞发生目的基因的敲除，已经足以进行很多的目的基因的生物学功能的研究了。如果希望获得100%基因敲除的细胞，可以自行使用本产品筛选单克隆细胞，或者委托碧云天进行单克隆细胞株的筛选服务。
本RIPA裂解液用于实验时，建议同时选购无任何靶向的对照细胞RIPA裂解液Control Knockout HEK293T RIPA Lysate (L00025)或靶向GFP的对照RIPA裂解液GFP Knockout HEK293T RIPA Lysate (L00027)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的RFC5基因敲除的质粒(L30480 pLenti-RFC5-sgRNA)、慢病毒(L30481 RFC5 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L30482 RFC5 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L30483 RFC5 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L30484 RFC5 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品，具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
用于制备本产品的RIPA裂解液为碧云天生产的P0013B RIPA裂解液(强)，其具体组分请查阅产品网页或说明书。
RFC5基因的基本信息如下：
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | RFC5 | 5985 | BC001866 | NM_007370 |
| About the gene | |
| Official Symbol | RFC5 |
| Previous Symbol | - |
| Official Full Name | replication factor C subunit 5 |
| Synonyms | RFC36 |
| Location | 12q24.23 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | P40937 |
| Pathway/Library | others |
| Gene Summary | The elongation of primed DNA templates by DNA polymerase delta and DNA polymerase epsilon requires the accessory proteins proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and replication factor C (RFC). RFC, also named activator 1, is a protein complex consisting of five distinct subunits of 140, 40, 38, 37, and 36 kD. This gene encodes the 36 kD subunit. This subunit can interact with the C-terminal region of PCNA. It forms a core complex with the 38 and 40 kDa subunits. The core complex possesses DNA-dependent ATPase activity, which was found to be stimulated by PCNA in an in vitro system. Alternatively spliced transcript variants encoding distinct isoforms have been reported. |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| L30483 | RFC5 Knockout HEK293T RIPA Lysate | 100µg |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存，3个月有效；-80℃保存，至少一年有效。
注意事项：碧云天拥有sgRNA序列的知识产权，如果需要sgRNA序列，请在订购后发送邮件向info@beyotime.com索取。sgRNA序列信息与本产品，未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。使用者在发表研究论文或结果时，应注明来源。
对于非目录产品的CRISPR基因敲除细胞RIPA裂解液的定制，可联系碧云天技术服务service@beyotime.com。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| L00025 | Control Knockout HEK293T RIPA Lysate | 100µg |
| L00027 | GFP Knockout HEK293T RIPA Lysate | 100µg |
| P0009 | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 5000次 |
| P0010 | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 500次 |
| P0010S | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 200次 |
| P0011 | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 5000次 |
| P0012 | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 500次 |
| P0012S | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 200次 |
| P0012A | SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
| P0012AC | SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
| P0013B | RIPA裂解液(强) | 100ml |
| P0014A/B | SDS-PAGE电泳液(Tris-Gly, Powder) | 1/10L |
| P0014C/D | SDS-PAGE电泳液(Tris-Gly, 10X) | 100/500ml |
| P0015 | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 2ml |
| P0015L | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 15ml |
| P0015B | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(2X) | 5ml |
| P0015F | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X) | 2ml |
