pLenti-ALKBH5-sgRNA (ALKBH5基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因,或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性,全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除,以及通过puromycin筛选稳定细胞株;也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装,然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得,sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时,建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的ALKBH5基因敲除的质粒(L24275 pLenti-ALKBH5-sgRNA)、慢病毒(L24276 ALKBH5 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L24277 ALKBH5 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L24278 ALKBH5 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L24279 ALKBH5 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品,具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
ALKBH5基因的基本信息如下:
Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
Human | ALKBH5 | 54890 | BC062339 | NM_017758 |
About the gene | |
Official Symbol | ALKBH5 |
Previous Symbol | OFOXD1 |
Official Full Name | alkB homolog 5, RNA demethylase |
Synonyms | FLJ20308 |
Location | 17p11.2 |
Gene Type | protein_coding |
Uniprot ID | Q6P6C2.2 |
Pathway/Library | others |
Gene Summary | Dioxygenase that demethylates RNA by oxidative demethylation: specifically demethylates N(6)-methyladenosine (m6A) RNA, the most prevalent internal modification of messenger RNA (mRNA) in higher eukaryotes (PubMed:23177736, PubMed:24489119, PubMed:24616105, PubMed:24778178). Can also demethylate N(6)-methyladenosine in single-stranded DNA (in vitro) (PubMed:24616105). Requires molecular oxygen, alpha-ketoglutarate and iron (PubMed:21264265, PubMed:23177736, PubMed:24489119, PubMed:24616105, PubMed:24778178). Demethylation of m6A mRNA affects mRNA processing and export (PubMed:23177736). Required for the late meiotic and haploid phases of spermatogenesis by mediating m6A demethylation in spermatocytes and round spermatids: m6A demethylation of target transcripts is required for correct splicing and the production of longer 3'-UTR mRNAs in male germ cells (By similarity). ALKB5_HUMAN,Q6P6C2 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
L24275 | pLenti-ALKBH5-sgRNA | 5µg |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,至少两年有效。
注意事项:碧云天拥有sgRNA序列的知识产权,如果需要sgRNA序列,请在订购后发送邮件向info@beyotime.com索取。sgRNA与质粒及其序列信息,未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。使用者在发表研究论文或结果时,应注明来源。
慢病毒包装使用的包装质粒,可以订购碧云天的Lentivirus Packaging Vectors Set A (L00002),包括pMDLg、Rev和VSV-g。
对于非目录产品的CRISPR基因敲除用的sgRNA表达质粒的定制,可联系碧云天技术服务service@beyotime.com。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。