pLenti-SMURF2-sgRNA (SMURF2基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因,或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性,全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除,以及通过puromycin筛选稳定细胞株;也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装,然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得,sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时,建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的SMURF2基因敲除的质粒(L10615 pLenti-SMURF2-sgRNA)、慢病毒(L10616 SMURF2 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L10617 SMURF2 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L10618 SMURF2 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L10619 SMURF2 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品,具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
SMURF2基因的基本信息如下:
Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
Human | SMURF2 | 64750 | BC009527 | NM_022739 |
About the gene | |
Official Symbol | SMURF2 |
Previous Symbol | - |
Official Full Name | SMAD specific E3 ubiquitin protein ligase 2 |
Synonyms | - |
Location | 17q23.3-q24.1 |
Gene Type | nonsense_mediated_decay |
Uniprot ID | Q9HAU4.1 |
Pathway/Library | Ubiquitin Ligases Genes Library |
Gene Summary | E3 ubiquitin-protein ligase which accepts ubiquitin from an E2 ubiquitin-conjugating enzyme in the form of a thioester and then directly transfers the ubiquitin to targeted substrates. Interacts with SMAD1 and SMAD7 in order to trigger their ubiquitination and proteasome-dependent degradation. In addition, interaction with SMAD7 activates autocatalytic degradation, which is prevented by interaction with SCYE1. Forms a stable complex with the TGF-beta receptor-mediated phosphorylated SMAD2 and SMAD3. In this way, SMAD2 may recruit substrates, such as SNON, for ubiquitin-mediated degradation. Enhances the inhibitory activity of SMAD7 and reduces the transcriptional activity of SMAD2. Coexpression of SMURF2 with SMAD1 results in considerable decrease in steady-state level of SMAD1 protein and a smaller decrease of SMAD2 level. Negatively regulates TGFB1-induced epithelial-mesenchymal transition and myofibroblast differentiation (PubMed:30696809). SMUF2_HUMAN,Q9HAU4 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
L10615 | pLenti-SMURF2-sgRNA | 5µg |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,至少两年有效。
注意事项:碧云天拥有sgRNA序列的知识产权,如果需要sgRNA序列,请在订购后发送邮件向info@beyotime.com索取。sgRNA与质粒及其序列信息,未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。使用者在发表研究论文或结果时,应注明来源。
慢病毒包装使用的包装质粒,可以订购碧云天的Lentivirus Packaging Vectors Set A (L00002),包括pMDLg、Rev和VSV-g。
对于非目录产品的CRISPR基因敲除用的sgRNA表达质粒的定制,可联系碧云天技术服务service@beyotime.com。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。