CDK4 Knockout HEK293T RIPA Lysate(CDK4基因敲除HEK293T细胞RIPA裂解液)是通过同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因并实现了目的基因CRISPR敲除的多克隆HEK293T细胞的RIPA裂解液。该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。本产品可用于该目的基因敲除后其信号通路相关蛋白的研究，也可以用于该基因相应抗体的验证。
本RIPA裂解液源于可同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因的慢病毒感染HEK293T细胞并经过puromycin筛选后获得的多克隆细胞。制备该细胞的相应慢病毒的基因序列的关键图谱信息请参考图1。
图1. 可同时表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的慢病毒其基因序列的关键图谱信息。
该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。
由于本细胞是通过CRISPR/Cas9技术获得的多克隆细胞，基于CRISPR/Cas9技术的特点，理论上平均有2/3的细胞发生移码突变而导致了目的基因的敲除，平均有1/3的细胞并未发生移码突变。很多情况下有约2/3的细胞发生目的基因的敲除，已经足以进行很多的目的基因的生物学功能的研究了。如果希望获得100%基因敲除的细胞，可以自行使用本产品筛选单克隆细胞，或者委托碧云天进行单克隆细胞株的筛选服务。
本RIPA裂解液用于实验时，建议同时选购无任何靶向的对照细胞RIPA裂解液Control Knockout HEK293T RIPA Lysate (L00025)或靶向GFP的对照RIPA裂解液GFP Knockout HEK293T RIPA Lysate (L00027)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的CDK4基因敲除的质粒(L01525 pLenti-CDK4-sgRNA)、慢病毒(L01526 CDK4 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L01527 CDK4 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L01528 CDK4 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L01529 CDK4 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品，具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
用于制备本产品的RIPA裂解液为碧云天生产的P0013B RIPA裂解液(强)，其具体组分请查阅产品网页或说明书。
CDK4基因的基本信息如下：
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | CDK4 | 1019 | BC003644 | NM_000075 |
| About the gene | |
| Official Symbol | CDK4 |
| Previous Symbol | - |
| Official Full Name | cyclin dependent kinase 4 |
| Synonyms | PSK-J3 |
| Location | 12q14.1 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | P11802 |
| Pathway/Library | Cancer Target Genes Library; Kinases Library; Cell Cycle Pathway Genes Library |
| Gene Summary | The protein encoded by this gene is a member of the Ser/Thr protein kinase family. This protein is highly similar to the gene products of S. cerevisiae cdc28 and S. pombe cdc2. It is a catalytic subunit of the protein kinase complex that is important for cell cycle G1 phase progression. The activity of this kinase is restricted to the G1-S phase, which is controlled by the regulatory subunits D-type cyclins and CDK inhibitor p16(INK4a). This kinase was shown to be responsible for the phosphorylation of retinoblastoma gene product (Rb). Mutations in this gene as well as in its related proteins including D-type cyclins, p16(INK4a) and Rb were all found to be associated with tumorigenesis of a variety of cancers. Multiple polyadenylation sites of this gene have been reported. |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| L01528 | CDK4 Knockout HEK293T RIPA Lysate | 100µg |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存，3个月有效；-80℃保存，至少一年有效。
注意事项：碧云天拥有sgRNA序列的知识产权，如果需要sgRNA序列，请在订购后发送邮件向info@beyotime.com索取。sgRNA序列信息与本产品，未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。使用者在发表研究论文或结果时，应注明来源。
对于非目录产品的CRISPR基因敲除细胞RIPA裂解液的定制，可联系碧云天技术服务service@beyotime.com。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| L00025 | Control Knockout HEK293T RIPA Lysate | 100µg |
| L00027 | GFP Knockout HEK293T RIPA Lysate | 100µg |
| P0009 | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 5000次 |
| P0010 | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 500次 |
| P0010S | BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 200次 |
| P0011 | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 5000次 |
| P0012 | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 500次 |
| P0012S | BCA蛋白浓度测定试剂盒 | 200次 |
| P0012A | SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
| P0012AC | SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 | 可制30-50块胶 |
| P0013B | RIPA裂解液(强) | 100ml |
| P0014A/B | SDS-PAGE电泳液(Tris-Gly, Powder) | 1/10L |
| P0014C/D | SDS-PAGE电泳液(Tris-Gly, 10X) | 100/500ml |
| P0015 | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 2ml |
| P0015L | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) | 15ml |
| P0015B | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(2X) | 5ml |
| P0015F | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X) | 2ml |
