碧云天生产的Exonuclease VIII, truncated，即核酸外切酶VIII截短体，来自大肠杆菌，是由碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的一种DNA外切酶。Exonuclease VIII, truncated具有5'至3'方向的DNA外切酶活性，特异性酶切线性双链DNA，5'末端为平端或粘端，或者5'末端为磷酸或羟基都有类似的酶活性，但Exonuclease VIII, truncated不能酶切环状DNA [1]。Exonuclease VIII, truncated经碧云天研发人员实测可以从5'至3'方向消化5'末端为磷酸或羟基的单链DNA，但对于5'末端为磷酸的单链DNA的消化活性要大大高于5'末端为羟基的单链DNA。

碧云天Exonuclease VIII, truncated识别并酶切DNA的原理请参考图1。

图1.碧云天Exonuclease VIII, truncated (D7088)识别并酶切DNA的示意图。Endonuclease VIII, truncated识别DNA的5'端并从5'端开始酶切DNA，生成dNMP。

碧云天Exonuclease VIII, truncated酶切线性双链DNA的效果请参考图2。

图2.碧云天Exonuclease VIII, truncated (D7088)和国外N公司的同类产品(Competitor)催化酶切线性双链DNA的效果图。在20µl反应体系中加入图中指定量的本产品或N公司的Exonuclease VIII, truncated，37ºC孵育30分钟进行酶切反应，70ºC加热15分钟进行失活，反应完毕后立即加入DNA上样缓冲液(6X) (D0071)，随后进行电泳分析，最终进行核酸染色和荧光成像分析。如图所示，本产品与N公司的产品相比，具有类似的催化效果。裂解反应体系(20μl)：20mM Tris-acetate, 50mM Potassium acetate, 10mM Magnesium acetate, 1mM DTT, pH7.9 @25ºC，100ng的线性双链DNA以及不同浓度的Exonuclease VIII, truncated。图中线性双链DNA底物为356bp的线性双链DNA片段。M, DNA marker (DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands) (D0110))。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

用途：在维持双链环状DNA的同时消化线性双链DNA。

来源：由大肠杆菌表达纯化而获得。

活性单位定义：One unit is defined as the amount of enzyme required to produce 1nmol of acid-soluble deoxyribonucleotide from double-stranded DNA in a total reaction volume of 50μl in 30 minutes at 37ºC in 1X Exonuclease VIII, truncated Buffer with 0.15mM sonicated duplex [3H] DNA.

纯度：不含除Exonuclease VIII, truncated之外的其它种类的外切酶，不含内切酶，不含RNA酶，不含磷酸酯酶。

酶储存溶液：50mM Tris-HCl, 100mM NaCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.1% TritonX-100, 50% (v/v) Glycerol (pH7.5@ 25ºC)。

10X Exonuclease VIII, truncated Buffer：200mM Tris-acetate, 500mM Potassium acetate, 100mM Magnesium acetate, 10mM DTT (pH7.9 @ 25ºC)。

失活或抑制：70ºC加热15分钟可使Exonuclease VIII, truncated失活。

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
D7088S-1	Exonuclease VIII, truncated (10U/µl)	50μl
D7088S-2	10X Exonuclease VIII, truncated Buffer	0.2ml
—	说明书	1份

产品编号	产品名称	包装
D7088M-1	Exonuclease VIII, truncated (10U/µl)	200μl
D7088M-2	10X Exonuclease VIII, truncated Buffer	0.8ml
—	说明书	1份

产品编号	产品名称	包装
D7088L-1	Exonuclease VIII, truncated (10U/µl)	1ml
D7088L-2	10X Exonuclease VIII, truncated Buffer	4ml
—	说明书	1份

保存条件：

-20ºC保存，至少两年有效。

注意事项：

本产品中在使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。

超纯水推荐选购碧云天的BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) (ST876)。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1.使用Exonuclease VIII, truncated (10U/µl)裂解线性双链DNA。
a.参考下表在冰浴中配制反应体系。

Component	Volume
Ultrapure Water	16µl
10X Exonuclease VIII, truncated Buffer	2µl
Linear double strand DNA (100ng/µl)	1µl
Exonuclease VIII, truncated (10U/µl)	1µl

注：请把除Exonuclease VIII, truncated (10U/µl)以外的组分充分混匀后再加入Exonuclease VIII, truncated (10U/µl)，加入Exonuclease VIII, truncated (10U/µl)后可以用移液器吹打或轻轻Vortex混匀。酶切DNA量较大时，可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系。
b.反应条件：37ºC，30分钟。
c.终止反应：70ºC加热15分钟进行失活。
2.其它用途请自行参考相关文献资料进行。
参考文献：
1.Joseph JW, Kolodner R. J Biol Chem. 1983. 258(17):10418-24.
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