碧云天生产的Bst DNA Polymerase, Large Fragment，即嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus, Bst) DNA Polymerase I大片段，具有5'→3' DNA聚合酶活性，不具有3'→5'和5'→3'的核酸外切酶活性。Bst DNA Polymerase, Large Fragment具有很强的链置换(strand displacement)能力，可应用于核酸的等温扩增反应，如环介导的等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)和滚环扩增(Rolling-circle amplification, RCA)等。
Bst DNA Polymerase, Large Fragment介导的等温扩增温度一般在50-68ºC之间，通常为65ºC。与Bst DNA Polymerase 2.0相比，本产品在进行等温扩增时不具有将dUTP掺入合成的DNA链的能力。
Bst DNA Polymerase具有5'→3'的核酸外切酶活性，而Bst DNA Polymerase, Large Fragment通过删除突变而缺失了5'→3'核酸外切酶活性。
活性定义：One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10nmol of dNTP into acid insoluble material in 30 minutes at 65ºC。
碧云天生产的Bst DNA Polymerase, Large Fragment酶活性参考图1。
图1.碧云天Bst DNA Polymerase, Large Fragment进行环介导等温扩增反应的效果。使用本产品或N公司的Bst DNA Polymerase, Large Fragment，在25µl体系，分别以不同量的(10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6, 10-7, 10-8, 10-9 ng)烟草花叶病毒的CaMV35启动子为模板，8U的Bst DNA Polymerase, Large Fragment (图1中简写为Bst)，引物：1.6µM FIP/BIP、0.2µM F3/B3、0.4µM LoopF/B，1.4mM dNTP each，在1X Bst Reaction Buffer中补加MgSO4至终浓度为8mM，65ºC孵育1h，80ºC加热20min灭活，然后进行1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测。如图所示，本产品与Competitor N公司的产品相比，具有略好或至少相当的酶活性效果。M, DNA marker (D0110 DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands))。
来源：Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I的大片段通过大肠杆菌重组表达和纯化而获得。
纯度：无DNA内切酶和外切酶活性。
用途：环介导等温扩增LAMP、解旋酶等温基因扩增(HDA)等DNA等温扩增，多重置换扩增(MDA)，全基因组扩增(WGA)，高GC含量DNA的测序，纳克级DNA模板的快速测序，建库测序等。
本产品为冻干粉，使用前需要溶解。推荐使用溶解储存液：10mM Tris-HCl (pH7.5), 50mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.1% Triton X-100, 50% (v/v) glycerol。
10X Bst Reaction Buffer：200mM Tris-HCl, 100mM KCl, 100mM (NH4)2SO4, 20mM MgSO4, 1% Triton X-100, pH 8.8 at 25°C。
失活或抑制：80ºC加热20min。
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D7049M-1 | Bst DNA Polymerase, Large Fragment (powder) | 4000U |
| D7049M-2 | 10X Bst Reaction Buffer | 1.5ml |
| D7049M-3 | 100mM MgSO4 | 1ml |
| — | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,至少一年有效。
注意事项：本产品为冻干粉，使用前需要先溶解，请使用推荐的溶解储存液进行溶解，溶解后的酶需要分装后保存于-20℃，避免反复冻融。
Bst DNA Polymerase, Large Fragment不具有3'→5'核酸外切酶活性。
建议等温扩增反应温度不能高于70ºC，否则会导致酶失活。
Bst DNA Polymerase，Large Fragment不能用于热循环测序和PCR。
每次等温扩增实验注意设置无模板DNA作为阴性对照。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| Reagent | Volume | Final concentration |
| Nuclease-Free Water | (13.5-x)μl | - |
| 10X Bst Reaction Buffer | 2.5μl | 1X |
| MgSO4 (100mM) | 1.5μl | 6mM (8mM total) |
| dNTP (10mM each) | 3.5μl | 1.4mM each |
| FIP/BIP Primers (25X, 40μM) | 1μl | 1.6μM |
| F3/B3 Primers (25X, 5μM) | 1μl | 0.2μM |
| LoopF/B Primers (25X, 10μM) | 1μl | 0.4μM |
| Template | xμl | > 10 copies or more |
| Bst DNA Polymerase, Large Fragment (8U/μl) | 1μl | 320U/ml |
| Total volume | 25μl | - |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D7050S | Bst DNA Polymerase, Large Fragment | 800U |
| D7050M | Bst DNA Polymerase, Large Fragment | 4000U |
| D7049M | Bst DNA Polymerase, Large Fragment (powder) | 4000U |
| D7053S | phi29 DNA Polymerase | 250U |
| D7053M | phi29 DNA Polymerase | 1kU |
| D7053L | phi29 DNA Polymerase | 5kU |
| D7053XL | phi29 DNA Polymerase | 20kU |
| D7055S | Bsu DNA Polymerase, Large Fragment | 200U |
| D7055M | Bsu DNA Polymerase, Large Fragment | 1000U |
| D7359-250µl | dUTP (100mM) | 250µl |
| D7359-1ml | dUTP (100mM) | 1ml |
| D7360S | Uracil-DNA Glycosylase (E. coli) | 1000U |
| D7360M | Uracil-DNA Glycosylase (E. coli) | 5000U |
| D7362S | Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) | 100U |
| D7362M | Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) | 500U |
| D7364S | Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) | 200U |
| D7364M | Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) | 1000U |
| D7364L | Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Cod) | 5000U |
| D7371 | dNTP Mixture (2.5mM each) | 1ml |
| D7373 | dNTP Mixture (25mM each) | 250μl |
| D7376-1ml | dNTP/dUTP Mixture (2.5mM each/5mM) | 1ml |
| D7376-5ml | dNTP/dUTP Mixture (2.5mM each/5mM) | 5ml |
