DNA末端平滑试剂盒
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产品编号 D7012
数量
¥ 150.00
产品包装:
20次
产品简介
使用说明
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产品问答

      DNA末端平滑试剂盒(DNA Blunting Kit)是利用T4 DNA聚合酶(T4 DNA Polymerase)的5'→3'DNA聚合酶活性和3'→5'的DNA外切酶活性,用于将酶切或PCR等反应后产生的粘末端转变为平末端的试剂盒。经过本试剂盒处理产生的平末端DNA片段可以用于常规的平端连接反应。
      粘末端有两种,一种为5'端突出末端,另外一种为3'端突出末端。本试剂盒可以将5'端突出末端补平,也可以将3'端突出末端削平(也称打平)。
      当末端为5'端突出末端时,T4 DNA Polymerase可以利用其5'→3'DNA聚合酶活性将末端补平;当末端为3'端突出末端时,T4 DNA Polymerase可以利用其3'→5'DNA外切酶活性将末端削平。
      Reaction Buffer(5X):335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃),33mM MgCl2,5mM DTT, 84mM(NH4)2SO4
      本试剂盒可以进行20个常规的末端平滑化反应。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
D7012-1 T4 DNA Polymerase(1U/μl) 20μl
D7012-2 Reaction Buffer(5X) 100μl
D7012-3 dNTP Mixture(2.5mM each) 50μl
说明书 1份

保存条件:
      -20℃保存。
注意事项: 
      使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 参考如下表格设置反应体系:

Reaction Buffer(5X) 4μl
dNTP Mixture(2.5mM each) 0.8μl
DNA 1μg
补充无核酸酶的去离子水 至19μl
T4 DNA Polymerase(1U/μl) 1μl

2. 按上述体系配好之后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
3. 11℃孵育20分钟,或室温(20-25℃)孵育5分钟。
4. 70℃孵育10分钟终止反应。随后可直接用于连接反应或纯化后用于连接反应。如果不直接用于后续反应,可以在-20℃保存。

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