pT7-3lac-C-His (毒性蛋白原核表达质粒)是碧云天自行研发的一种适用于严谨控制目的蛋白本底性表达C端含有His标签(His-tag)的对于细菌有毒性的目的蛋白的原核表达质粒。本质粒含有T7启动子，在RBS位点的前面插入了3个乳糖操纵子lac；本质粒表达的lac阻遏物lacI可以结合在3个乳糖操纵子上强力抑制T7启动子的转录起始，从而抑制毒性蛋白在没有诱导情况下的背景表达对细菌生长的影响[1]。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)的诱导下，则可以高效启动目的蛋白表达，尤其是毒性蛋白的高效表达。在多克隆位点的后面有一个His标签的编码序列，该His标签编码6个组氨酸(6X His)。在多克隆酶切位点之间按照读码框插入不带有终止密码子的目的基因，这样就可以表达C端带有His标签的目的蛋白。当然用户也可以在多克隆位点插入N端带其它标签的蛋白，然后在蛋白的C端插入终止密码子。
本质粒为卡那霉素(Kanamycin)，可利用其卡那霉素抗性，转化大肠杆菌后筛选阳性克隆。
通常可以采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) (P2210/P2218/P2220)/His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) (P2226)或BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) (P2233)/His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) (P2229S)等纯化本质粒表达的目的蛋白融合蛋白，也可以使用His-tag抗体(AH367)检测或少量分离纯化目的蛋白。
pT7-3lac-C-His质粒(5317bp)的图谱如下：
pT7-3lac-C-His质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| f1 ori | 12-467 |
| Kanamycin resistance ORF | 560-1375 |
| ori | 1497-2085 |
| rop gene | 2515-2706 |
| lacI | 3515-4597 |
| lacI promoter | 4598-4675 |
| T7 promoter | 4984-5002 |
| lac operator | 5003-5027 |
| lac operator | 5028-5052 |
| lac operator | 5053-5077 |
| RBS | 5092-5114 |
| His tag | 5161-5178 |
| T7 terminator | 5245-5292 |
pT7-3lac-C-His的多克隆位点的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D5015 pT7-3lac-C-His (毒性蛋白原核表达质粒).pdf
pT7-3lac-C-His中没有的酶切位点包括：
| AarI | AatI | AatII | AbsI | Acc36I | Acc65I | Acc113I |
| AcvI | AflII | AgeI | AhdI | AhlI | AjiI | AleI |
| AscI | AsiGI | Asp718I | AspA2I | AspEI | AsuII | AsuNHI |
| AvrII | AxyI | BaeI | BalI | BbrPI | BbvCI | BcuI |
| BfrI | BfuAI | BlnI | BmcAI | BmeRI | BmgBI | BmtI |
| BplI | Bpu14I | BsaI | Bse21I | BseRI | BseX3I | BshTI |
| BsiWI | Bso31I | Bsp19I | Bsp119I | Bsp1407I | BspMI | BspOI |
| BspTI | BspT104I | BspTNI | BsrGI | Bst98I | BstAFI | BstAUI |
| BstBI | BstSNI | BstZI | Bsu36I | BtrI | BveI | CciNI |
| Cfr42I | CpoI | CsiI | CspI | Csp45I | CspAI | CspCI |
| DraI | DriI | EagI | Eam1105I | EclXI | Eco31I | Eco52I |
| Eco72I | Eco81I | Eco105I | Eco147I | FalI | FseI | I-CeuI |
| I-PpoI | I-SceI | KflI | KpnI | KspI | MabI | MauBI |
| MfeI | MlsI | MluNI | MreI | MscI | Msp20I | MspCI |
| MssI | MunI | Nb.BbvCI | NcoI | NcoI | NotI | NspV |
| Nt.BbvCI | OliI | PacI | PalAI | PasI | PceI | Pfl23II |
| PI-PspI | PI-SceI | PinAI | PmaCI | PmeI | PmlI | PspCI |
| PspLI | PsrI | PstI | RigI | RsrII | Rsr2I | SacII |
| SanDI | SbfI | ScaI | SdaI | SexAI | SfiI | Sfr303I |
| SfuI | SgrBI | SgrDI | SgsI | SmiI | SnaBI | SpeI |
| SrfI | Sse8387I | SseBI | SspBI | SstII | StuI | SwaI |
| Vha464I | XmaJI | ZraI | ZrmI |
pT7-3lac-C-His中的单酶切位点包括：
| AcuI | AlwNI | ApaI | AsiSI | BamHI | BclI | BglI |
| BglII | BlpI | BspDI | BspQI | BssHII | BssSI | BstAPI |
| BstEII | BstZ17I | ClaI | DraIII | Eco53kI | EcoRI | EcoRV |
| FspI | HindIII | HpaI | MluI | NdeI | NmeAIII | NruI |
| PaeR7I | PciI | PflFI | PpuMI | PshAI | PsiI | PspOMI |
| PspXI | PvuI | SacI | SalI | SapI | SgrAI | SmaI |
| SphI | StyI | TspMI | Tth111I | XbaI | XhoI | XmaI |
pT7-3lac-C-His质粒中对于插入片段进行测序时，推荐使用的正向测序引物T7和反向测序引物T7 ter primer的序列如下：
T7 primer (4984-5002): 5'TAATACGACTCACTATAGG3'
T7 ter primer (5231-5249): 5'GCTAGTTATTGCTCAGCGG3'
pT7-3lac-C-His的全序列信息:D5015 pT7-3lac-C-His 全序列.txt
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D5015-1µg | pT7-3lac-C-His | 1µg |
| D5015-100µg | pT7-3lac-C-His | 100µg |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项：本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| P2210 | BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) | 10ml |
| P2218 | BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) | 100ml |
| P2220 | BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) | 1000ml |
| P2226 | His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) | 10ml |
| P2233 | BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) | 10ml |
| P2229S | His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) | 10ml |
| AH367 | His-tag抗体(小鼠单抗) | >20次 |
