pTac-His-MBP-WELQ是碧云天研发的一种用于在目的蛋白N端同时融合表达His标签(His tag)和MBP标签(MBP tag)的双标签，并在两个标签与目的蛋白之间有WELQ Protease (P2311)酶切位点的原核表达质粒。MBP标签的融合表达有利于提高目的蛋白的表达量和蛋白稳定性，促进蛋白的可溶性和正确折叠；而His标签有利于通过镍柱进行目的蛋白MBP融合蛋白的分离纯化。使用本质粒，在镍柱纯化后获得的含有His和MBP双标签的目的蛋白可以通过WELQ Protease酶切去除His标签和MBP标签。
本质粒含有Tac启动子/lac操纵子，可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG) (ST098/ST1416)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点根据读码框插入目的基因就可以表达N端含有His和MBP双标签的目的蛋白。
本质粒在MBP标签后含有WELQ Protease识别的四肽序列W-E-L-Q↓X (Trp-Glu-Leu-Gln↓X，X为任意氨基酸)，该识别位点上含有PstⅠ酶切位点，便于构建不含有额外氨基酸的融合蛋白。因此，可以利用WELQ Protease酶切除去目的蛋白N端的His标签和MBP标签，且目的蛋白N端不会保留额外的氨基酸[1]。
可采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) (P2210/P2218/P2220)/His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) (P2226)或BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) (P2233)/His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) (P2229)等纯化本质粒表达的目的蛋白融合蛋白，也可以使用His-tag抗体(AH367)检测或少量分离纯化目的蛋白。
本质粒为氨苄青霉素抗性。
pTac-His-MBP-WELQ质粒(6663bp)的图谱如下：
pTac-His-MBP-WELQ质粒的主要信息如下：
| Feature Nucleotide | Position |
| lacI promoter | 3-80 |
| LacI coding sequence | 81-1163 |
| Tac promoter | 1406-1434 |
| lac operator | 1442-1458 |
| His tag coding sequence | 1531-1560 |
| MBP tag coding sequence | 1561-2658 |
| WELQ site | 2683-2694 |
| Multiple cloning sites (PstⅠ-XhoI) | 2689-2750 |
| M13 forward primer (M13 fwd) | 2754-2770 |
| Ampicillin resistance ORF | 3435-4295 |
| f1 origin | 4337-4850 |
| pBR322 origin | 4961-5549 |
pTac-His-MBP-WELQ的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D5002 pTac-His-MBP-WELQ (原核活性蛋白高表达质粒).pdf。
pTac-His-MBP-WELQ中没有的酶切位点包括：
| AarI | AatII | AbsI | AflII | AgeI | AleI | AscI |
| AsiSI | AvrII | BaeI | BarI | BbvCI | BmtI | BplI |
| BseRI | BspDI | BsrGI | BstBI | Bsu36I | ClaI | CspCI |
| EagI | EcoNI | FalI | FseI | I-CeuI | I-PpoI | I-SceI |
| KflI | MauBI | MfeI | MreI | NheI | NotI | NruI |
| PacI | PasI | PI-PspI | PI-SceI | PmeI | PmlI | PshAI |
| PsrI | RsrII | SbfI | SexAI | SfiI | SgrAI | SgrDI |
| SnaBI | SpeI | SphI | SrfI | StuI | XmnI | ZraI |
pTac-His-MBP-WELQ中的单酶切位点包括：
| Acc65I | G`GTAC,C | 2733 | NcoI | C`CATG,G | 2739 |
| AhdI | GACNN,N`NNGTC | 4222 | NdeI | CA`TA,TG | 1526 |
| ApaI | G,GGCC`C | 642 | NgoMIV | G`CCGG,C | 4720 |
| BamHI | G`GATC,C | 2727 | NsiI | A`TGCA,T | 1532 |
| BglII | A`GATC,T | 1917 | PaeR7I | C`TCGA,G | 2745 |
| BlpI | GC`TNA,GC | 2344 | PciI | A`CATG,T | 5605 |
| BmgBI | CAC|GTC | 2100 | PflFI | GACN`N,NGTC | 5863 |
| Bpu10I | CC`TNA,GC | 6500 | PflMI | CCAN,NNN`NTGG | 13 |
| BsiWI | C`GTAC,G | 1848 | PluTI | G,GCGC`C | 1074 |
| BsmI | GAATG,CN` | 2178 | PspOMI | G`GGCC,C | 638 |
| BspQI | GCTCTTCN`NNN, | 5722 | PspXI | VC`TCGA,GB | 2745 |
| BstEII | G`GTNAC,C | 612 | PstI | C,TGCA`G | 2693 |
| BstZ17I | GTA|TAC | 5838 | SacI | G,AGCT`C | 2668 |
| DraIII | CAC,NNN`GTG | 4619 | SacII | CC,GC`GG | 2506 |
| Eco53kI | GAG|CTC | 2666 | SalI | G`TCGA,C | 2707 |
| EcoRI | G`AATT,C | 2695 | SapI | GCTCTTCN`NNN, | 5722 |
| EcoRV | GAT|ATC | 881 | ScaI | AGT|ACT | 3741 |
| FspAI | RTGC|GCAY | 6628 | SfoI | GGC|GCC | 1072 |
| HindIII | A`AGCT,T | 2701 | SmaI | CCC|GGG | 2723 |
| HpaI | GTT|AAC | 937 | StyI | C`CWWG,G | 2739 |
| KasI | G`GCGC,C | 1070 | SwaI | ATTT|AAAT | 4394 |
| KpnI | G,GTAC`C | 2737 | TspMI | C`CCGG,G | 2721 |
| MluI | A`CGCG,T | 431 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 5863 |
| MscI | TGG|CCA | 6638 | XbaI | T`CTAG,A | 2713 |
| NaeI | GCC|GGC | 4722 | XhoI | C`TCGA,G | 2745 |
| NarI | GG`CG,CC | 1071 | XmaI | C`CCGG,G | 2721 |
pTac-His-MBP-WELQ质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
Forward primer (2754-2770): 5'-ACTGGCCGTCGTTTTAC-3'
Reverse primer (1446-1469): 5'-GAGCGGATAACAATTTCACACAGG-3'
pTac-His-MBP-WELQ的全序列信息：D5002 pTac-His-MBP-WELQ (原核活性蛋白高表达质粒)序列.txt
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D5002-1µg | pTac-His-MBP-WELQ (原核活性蛋白高表达质粒) | 1µg |
| D5002-100µg | pTac-His-MBP-WELQ (原核活性蛋白高表达质粒) | 100µg |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项：本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| AH367 | His-tag抗体(小鼠单抗) | >20次 |
| D5001-1µg | pTac-His-MBP-PreScission (原核活性蛋白高表达质粒) | 1µg |
| D5001-100µg | pTac-His-MBP-PreScission (原核活性蛋白高表达质粒) | 100µg |
| D5002-1µg | pTac-His-MBP-WELQ (原核活性蛋白高表达质粒) | 1µg |
| D5002-100µg | pTac-His-MBP-WELQ (原核活性蛋白高表达质粒) | 100µg |
| D5005-1μg | pTac-GST-WELQ | 1μg |
| D5005-100μg | pTac-GST-WELQ | 100μg |
| D5008-1μg | pT7-N-His-WELQ | 1μg |
| D5008-100μg | pT7-N-His-WELQ | 100μg |
| D5010-1μg | pT7-N-His-SUMO-WELQ | 1μg |
| D5010-100μg | pT7-N-His-SUMO-WELQ | 100μg |
| P2311S | WELQ Protease | 500U |
| P2311M | WELQ Protease | 2500U |
| P2311L | WELQ Protease | 10kU |
| P2210 | BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) | 10ml |
| P2218 | BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) | 100ml |
| P2220 | BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) | 1000ml |
| P2226 | His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) | 10ml |
| P2233-10ml | BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) | 10ml |
| P2233-100ml | BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) | 100ml |
| P2233-1000ml | BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) | 1000ml |
| P2229S | His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) | 10ml |
