pCoHygro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒)是碧云天研发的一种用于构建诱导型S2果蝇细胞(Drosophila Schneider 2)稳定细胞株的筛选质粒。本质粒与S2果蝇细胞诱导型表达质粒共转染至S2果蝇细胞后，通过潮霉素B (Hygromycin B) (ST1389)筛选可以得到含有目的基因的诱导型S2果蝇稳定细胞株，从而有效提高重组蛋白表达量。后续可进一步通过单克隆细胞筛选得到高表达重组蛋白的稳定细胞株，便于大规模生产。
S2果蝇细胞，也称S2果蝇胚胎细胞、S2细胞、S2昆虫细胞，源自20-24小时龄的黑腹果蝇胚胎晚期的原代细胞培养物[1]。S2果蝇细胞在培养皿或培养瓶中为半贴壁细胞，在摇瓶中为悬浮细胞，无需CO2，可在室温(26-28ºC)培养，生长速度快，细胞密度高，可通过瞬时转染或稳定细胞系表达外源重组蛋白，兼容无血清培养基，已广泛用于大规模重组蛋白的生产[2]。
本质粒采用copia启动子，能够在S2果蝇细胞中高效启动Hygromycin B phosphotransferase (Hygro)基因的组成型表达。建议在筛选诱导型S2果蝇稳定细胞株之前，先通过瞬时转染测试重组蛋白能否表达。潮霉素B建议使用浓度为300µg/ml，筛选时间为3-4周左右。本系列产品包含pCoPuro (D4701)、pCoBlast (D4705)、pCoHygro (D4708)，分别使用嘌呤霉素、灭瘟素S和潮霉素B进行筛选。
S2果蝇细胞稳定细胞株通常含有多拷贝的插入基因，插入基因可形成500-1000个首尾相连的拷贝阵列。如需优化特定重组蛋白的表达量，可通过调节S2果蝇细胞诱导型表达质粒与pCoHygro质粒共转染时载体的比例，控制插入基因拷贝的数量。通常建议使用S2果蝇细胞诱导型表达质粒:pCoHygro质粒=19:1 (摩尔比)。
本质粒具有氨苄青霉素(Ampicillin)抗性，可利用其氨苄青霉素抗性转化大肠杆菌后筛选阳性菌。
pCoHygro质粒的图谱如下：
pCoHygro质粒的主要信息如下：
| Base pairs | 4525 |
| M13 Forward | 379-395 |
| copia promoter | 500-779 |
| Hygromycin B phosphotransferase | 804-1829 |
| SV40 poly (A) signal | 2142-2276 |
| M13 Reverse | 2304-2320 |
| lac operator | 2328-2344 |
| lac promoter | 2352-2382 |
| CAP binding site | 2397-2418 |
| ori | 2706-3294 |
| Ampicillin | 3465-4325 |
| Ampicillin promoter | 4326-4430 |
pCoHygro的部分详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D4708 pCoHygro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒).pdf
pCoHygro中没有的酶切位点包括：
| AarI | AatI | AccB7I | AcvI | AfeI | AflII | AhlI |
| AjiI | AlfI | AloI | Aor51HI | ApaI | AscI | AspA2I |
| AsuII | AvrII | AxyI | BaeI | BanIII | BarI | BbrPI |
| BbsI | BclI | BcuI | BfrI | BglII | BlnI | BmgBI |
| BpiI | Bpu14I | BpuAI | Bsa29I | BsaAI | BsaBI | Bse8I |
| Bse21I | BseCI | BseJI | BsePI | BseRI | BshVI | BsiWI |
| Bsp68I | Bsp119I | Bsp120I | Bsp1407I | BspDI | BspTI | BspT104I |
| BspXI | BsrGI | BssHII | BssNAI | Bst98I | Bst1107I | BstAFI |
| BstAUI | BstBI | BstBAI | BstEII | BstENI | BstHPI | BstPI |
| BstSNI | BstV2I | BstXI | BstZ17I | Bsu15I | Bsu36I | BsuTUI |
| BtrI | BtuMI | CciNI | Cfr9I | ClaI | CsiI | Csp45I |
| CspCI | Eco32I | Eco47III | Eco72I | Eco81I | Eco91I | Eco105I |
| Eco147I | EcoNI | EcoO65I | EcoRV | EcoT22I | FalI | FbaI |
| FseI | FspAI | HpaI | I-CeuI | I-PpoI | I-SceI | KflI |
| Ksp22I | KspAI | MabI | MamI | MauBI | MfeI | MluI |
| Mph1103I | MreI | MroNI | MspCI | MssI | MunI | NaeI |
| NgoMIV | NotI | NruI | NsiI | NspV | PacI | PalAI |
| PauI | PceI | PdiI | Pfl23II | PflMI | PI-PspI | PI-SceI |
| PmaCI | PmeI | PmlI | Ppu21I | PpuMI | Psp5II | PspCI |
| PspEI | PspLI | PspOMI | PspPPI | PsrI | PteI | RigI |
| RruI | SanDI | SexAI | SfiI | SfuI | SgrAI | SgrDI |
| SgsI | SmaI | SmiI | SnaBI | SpeI | SrfI | SseBI |
| SspBI | StuI | SwaI | TspMI | TstI | Van91I | Vha464I |
| XagI | XcmI | XmaI | XmaCI | XmaJI | Zsp2I |
pCoHygro中的单酶切位点包括：
| AbsI | AccI | Acc65I | AflIII | AgeI | AhdI | AleI |
| AlwNI | AsiSI | BamHI | BanII | BbvCI | BlpI | BmtI |
| BsaI | BsgI | BsmI | BspQI | BtgZI | Eco53kI | HindIII |
| KasI | KpnI | NarI | NheI | PaeR7I | PasI | PciI |
| PfoI | PluTI | PshAI | PspXI | RsrII | SacI | SacII |
| SalI | SapI | SbfI | SfoI | SphI | SspI | XbaI |
| XhoI | XmnI |
pCoHygro质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
M13 Forward (379-395): 5'-GTAAAACGACGGCCAGT-3'
M13 Reverse (2304-2320): 5'-CAGGAAACAGCTATGAC-3'
pCoHygro的全序列信息: D4708 pCoHygro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) 全序列.txt
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D4708-1µg | pCoHygro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 1µg |
| D4708-100µg | pCoHygro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 100µg |
| — | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存。
注意事项：本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D4701-1µg | pCoPuro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 1µg |
| D4701-100µg | pCoPuro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 100µg |
| D4705-1µg | pCoBlast (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 1µg |
| D4705-100µg | pCoBlast (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 100µg |
| D4708-1µg | pCoHygro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 1µg |
| D4708-100µg | pCoHygro (S2果蝇细胞稳定细胞株筛选质粒) | 100µg |
| D4712-1µg | pMT/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 1µg |
| D4712-100µg | pMT/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 100µg |
| D4716-1µg | pMT/V5-His A (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
| D4716-100µg | pMT/V5-His A (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
| D4719-1µg | pMT/V5-His B (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
| D4719-100µg | pMT/V5-His B (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
| D4721-1µg | pMT/V5-His C (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
| D4721-100µg | pMT/V5-His C (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
| D4724-1µg | pMT/BiP/V5-His/EGFP (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 1µg |
| D4724-100µg | pMT/BiP/V5-His/EGFP (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 100µg |
| D4727-1µg | pMT/BiP/V5-His A (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
| D4727-100µg | pMT/BiP/V5-His A (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
| D4732-1µg | pMT/BiP/V5-His B (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
| D4732-100µg | pMT/BiP/V5-His B (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
| D4735-1µg | pMT/BiP/V5-His C (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
| D4735-100µg | pMT/BiP/V5-His C (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
| D4739-1µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
| D4739-100µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
| D4742-1µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro-P2A-mCherry (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
| D4742-100µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro-P2A-mCherry (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
| D4745-1µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro-P2A-ZsGreen (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 1µg |
| D4745-100µg | pMT/BiP/V5-His/CoPuro-P2A-ZsGreen (S2果蝇细胞诱导型表达质粒) | 100µg |
| D4748-1µg | pAc5.1/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 1µg |
| D4748-100µg | pAc5.1/V5-His/lacZ (S2果蝇细胞阳性对照质粒) | 100µg |
| D4751-1µg | pAc5.1/V5-His A (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 1µg |
| D4751-100µg | pAc5.1/V5-His A (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 100µg |
| D4755-1µg | pAc5.1/V5-His B (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 1µg |
| D4755-100µg | pAc5.1/V5-His B (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 100µg |
| D4759-1µg | pAc5.1/V5-His C (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 1µg |
| D4759-100µg | pAc5.1/V5-His C (S2果蝇细胞组成型表达质粒) | 100µg |
