pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc是碧云天研发的包含了C端Myc标签和新冠病毒(SARS-CoV-2)包膜(Envelop,E)蛋白基因序列的质粒。本产品在哺乳动物细胞中的表达效果未经验证,仅确保质粒序列正确。本质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定转染了本质粒的细胞株。
E蛋白是SARS-CoV-2冠状病毒最小的结构蛋白,仅由75个氨基酸残基组成,主要分布于病毒包膜上。冠状病毒E蛋白包含可以形成同源五聚体的α-螺旋跨膜结构域(transmembrane domain)。该同源五聚体形成的离子通道(Ion channels)对离子的选择性较差。E蛋白参与病毒的组装和释放并与病毒的致病性有关,它与M蛋白的相互作用对病毒出芽过程起重要作用。
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
E protein | 677-901 |
Myc-tag | 902-931 |
Multiple cloning site | 935-1001 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 1044-1065 |
SV40 polyA signal | 1077-1460 |
f1 origin of ss-DNA replication | 1598-1902 |
bla promoter | 1927-2051 |
SV40 promoter | 2071-2409 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2444-3235 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3236-3694 |
pUC origin | 3823-4490 |
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc质粒(4542bp)的图谱如下:
pcDNA3.1-SARS-CoV-2-E-Myc的多克隆位点的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2947 pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc.pdf
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc)包括:
AclI | AflII | AhdI | AleI | AscI | AsiSI | BaeI |
BbsI | BbvCI | BcgI | BlpI | BmgBI | Bpu10I | BsgI |
BsiWI | BsmBI | BspEI | BspQI | BsrGI | BssHII | BstEII |
BstXI | BstZ17I | EcoNI | Esp3I | FseI | NotI | NruI |
PflMI | PmeI | PmlI | PpuMI | PshAI | PspXI | SacII |
SapI | SbfI | ScaI | SgrAI | SmaI | SrfI | SwaI |
TspMI | XcmI | XmaI | XmnI |
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc)包括:
AccI | GT`MK,AC | 966 | KasI | G`GCGC,C | 2571 |
AfeI | AGC|GCT | 660 | MfeI | C`AATT,G | 1324 |
AgeI | A`CCGG,T | 664 | MluI | A`CGCG,T | 1460 |
ApaI | G,GGCC`C | 999 | MscI | TGG|CCA | 2654 |
ApaLI | G`TGCA,C | 4176 | NarI | GG`CG,CC | 2572 |
AvaI | C`YCGR,G | 977 | NdeI | CA`TA,TG | 240 |
BamHI | G`GATC,C | 935 | NheI | G`CTAG,C | 597 |
BclI | T`GATC,A | 1231 | PaeR7I | C`TCGA,G | 977 |
BglII | A`GATC,T | 971 | PciI | A`CATG,T | 4490 |
BmtI | G,CTAG`C | 601 | PflFI | GACN`N,NGTC | 2690 |
BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 3561 | PluTI | G,GCGC`C | 2575 |
BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 1624 | PspOMI | G`GGCC,C | 995 |
BseRI | GAGGAG(N)8,NN` | 2390 | PstI | C,TGCA`G | 951 |
BsoBI | C`YCGR,G | 977 | PvuI | CG,AT`CG | 1077 |
BspDI | AT`CG,AT | 2412 | RsrII | CG`GWC,CG | 3088 |
BsrDI | GCAATG,NN` | 2805 | SacI | G,AGCT`C | 655 |
BstBI | TT`CG,AA | 3254 | SalI | G`TCGA,C | 965 |
BtsI | GCAGTG,NN` | 1413 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 2347 |
ClaI | AT`CG,AT | 2412 | SfoI | GGC|GCC | 2573 |
CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 382 | SnaBI | TAC|GTA | 346 |
DraIII | CAC,NNN`GTG | 1690 | SpeI | A`CTAG,T | 989 |
EagI | C`GGCC,G | 2478 | StuI | AGG|CCT | 2393 |
Eco53kI | GAG|CTC | 653 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 2690 |
EcoRV | GAT|ATC | 961 | XhoI | C`TCGA,G | 977 |
HindIII | A`AGCT,T | 941 |
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T3 primer (620-639): 5'-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3'
T7 primer(1044-1065): 5'-GTAATACGACTCACTATAGGGC- 3'
pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc的全序列信息: D2947 pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc序列.txt。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2947-1μg | pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc | 1μg |
D2947-100μg | pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc | 100μg |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项:本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2941-1µg | pcDNA3.1-SARS-CoV-2-M-Myc | 1µg |
D2941-100µg | pcDNA3.1-SARS-CoV-2-M-Myc | 100µg |
D2943-1µg | pcDNA3.1-SARS-CoV-2-N-Myc | 1µg |
D2943-100µg | pcDNA3.1-SARS-CoV-2-N-Myc | 100µg |
D2945-1µg | pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc | 1µg |
D2945-100µg | pcDNA3.1-SARS-CoV-2- Spike -Myc | 100µg |
D2947-1µg | pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc | 1µg |
D2947-100µg | pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc | 100µg |
D2949-1µg | pcDNA3.1-ACE2 -Flag | 1µg |
D2949-100µg | pcDNA3.1-ACE2 -Flag | 100µg |
D2951-1µg | pcDNA3.1-ACE2(1-615) -His | 1µg |
D2951-100µg | pcDNA3.1-ACE2(1-615) - His | 100µg |
D2953-1µg | pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp) | 1µg |
D2953-100µg | pUC18-SARS-CoV-2-ORF1ab(168bp) | 100µg |