pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc
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产品编号 D2945-1μg
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¥ 888.00
产品包装:
1μg 100μg
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pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc是碧云天自行研发的包含了C端Myc标签序列和新冠病毒(SARS-CoV-2)纤突(Spike)蛋白基因序列的质粒。本产品在哺乳动物细胞中的表达效果未经验证,仅确保质粒序列正确。本质粒为氨苄青霉素抗性。

Spike蛋白(S蛋白)是冠状病毒的四个结构蛋白之一,为细胞表面糖蛋白(surface glycoprotein),由Spike基因编码,以同源三聚体的形式存在于冠状病毒刺突上,参与受体识别和膜融合等病毒感染过程。在结构上,Spike蛋白分为三个主要结构域:胞外区、跨膜区和胞内区,其中胞外区包括S1,S2两个结构域,S1结构域位于Spike蛋白N端,含有宿主受体结构域(receptor binding domain,RBD),SARS-CoV-2通过RBD与血管紧张素转换酶2(ACE2)的肽酶结构域(peptidase domain)结合,参与SARS-CoV-2病毒的感染。SARS-CoV-2 Spike蛋白与ACE2的亲和常数大约为15nM,是SARS-CoV Spike蛋白与ACE2的亲和常数的10-20倍[1];S2结构域位于Spike蛋白的C端,由一段融合肽段与两个疏水螺旋重复区(HR1,HR2)组成,参与病毒感染的膜融合过程。Spike蛋白是冠状病毒疫苗、治疗性抗体和诊断方法的关键靶标。

pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
CMV promoter 232-819
T7 promoter and T7 primer binding site 863-882
Multiple cloning site 895-922
Spike protein 923-4741
Myc-tag 4742-4771
BGH pA 4812-5042
f1 origin of ss-DNA replication 5088-5516
SV40 promoter 5521-5864
Neomycin resistance ORF 5926-6720
SV40 polyA signal 6894-7024
pUC origin 7407-8077
Ampicillin resistance ORF 8222-9218
bla promoter 9117-9123

pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc质粒(9218bp)的图谱如下:

pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc的多克隆位点的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2945 pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc.pdf

pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc)包括:

AfeI AgeI AscI AsiSI BaeI BbvCI BlpI
BsiWI BsmBI BspEI Esp3I FseI NotI PacI
PflMI PpuMI SacII SbfI SfiI SgrAI SrfI

pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc)包括:

Acc65I G`GTAC,C 917 KpnI G,GTAC`C 921
AflII C`TTAA,G 908 MfeI C`AATT,G 161
AhdI GACNN,N`NNGTC 8295 MluI A`CGCG,T 228
AleI CACNN|NNGTG 4283 NarI GG`CG,CC 6054
ApaI G,GGCC`C 4791 NheI G`CTAG,C 895
BamHI G`GATC,C 4673 NruI TCG|CGA 208
BcgI ,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` 8800 PaeR7I C`TCGA,G 4775
BmgBI CAC|GTC 3869 PluTI G,GCGC`C 6057
BmtI G,CTAG`C 899 PshAI GACNN|NNGTC 4121
Bpu10I CC`TNA,GC 180 PspOMI G`GGCC,C 4787
BspDI AT`CG,AT 4515 PspXI VC`TCGA,GB 4775
BssHII G`CGCG,C 6451 PvuI CG,AT`CG 8665
BstEII G`GTNAC,C 2432 RsrII CG`GWC,CG 6570
BstZ17 GTA|TAC 7026 SacI G,AGCT`C 818
Bsu36I CC`TNA,GG 1572 SfoI GGC|GCC 6055
ClaI AT`CG,AT 4515 SmaI CCC|GGG 5867
EagI C`GGCC,G 5960 SnaBI TAC|GTA 590
Eco53kI GAG|CTC 816 StuI AGG|CCT 5843
EcoO109I RG`GNC,CY 4787 SwaI ATTT|AAAT 4500
EcoRI G`AATT,C 2230 TspMI C`CCGG,G 5865
EcoRV GAT|ATC 3859 XbaI T`CTAG,A 4781
HpaI GTT|AAC 2767 XhoI C`TCGA,G 4775
KasI G`GCGC,C 6053 XmaI C`CCGG,G 5865

pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:

pcDNA3.1 primer (829-848): 5'- CTAGAGAACCCACTGCTTAC -3'

BGH pA primer (4812-4829): 5'- TAGAAGGCACAGTCGAGG -3'

pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc的全序列信息:D2945 pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc序列.txt

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D2945-1μg pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc 1μg
D2945-100μg pcDNA3.1-SARS-CoV-2-Spike-Myc 100μg
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
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