pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA是碧云天研发的以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为表达菌株，带有双启动子的表达质粒。本质粒可以在多克隆位点(Multiple cloning sites, MCS)按照开放读码框(Open reading frame, ORF)插入不带有终止密码子的目的基因，经半乳糖诱导可以通过GAL1 promoter表达C端带有His标签(His Tag, HHHHHH)的目的蛋白或通过GAL10 promoter表达C端带有Flag标签(Flag Tag, DYKDDDDK)的目的蛋白，并且这两种蛋白可以同时表达。
酿酒酵母是真核生物，基因组约1.2×107bp，细胞核内含有16条染色体，约6000个ORF，仅4%的酵母基因有内含子，遗传背景简单[1]。酿酒酵母具有类似原核生物的生长特性，便于培养和进行遗传操作，是一种模式真核生物，被称为真核生物的“大肠杆菌”。酿酒酵母表达系统表达外源基因时具有一定的翻译后加工能力，收获的外源蛋白质在一定程度上进行了折叠加工和糖基化修饰，有利于保持蛋白的活性和稳定性，并且外源基因可在酿酒酵母中分泌表达，表达产物分泌至胞外不仅有利于纯化，还避免了产物在胞内大量蓄积[2]。
酿酒酵母能够以半乳糖为唯一碳源。半乳糖通过特定的半乳糖苷通透酶(Galactoside permease)运输到细胞中，并通过半乳糖激酶、α-D-半乳糖-1-磷酸尿苷转移酶和尿苷二磷酸葡萄糖-4-差异构酶的顺序作用转化为葡萄糖-1-磷酸，这三种酶分别由名为GAL1、GAL7和GAL10的一簇紧密联系的基因编码[3]。酿酒酵母转化中质粒的选择基于营养缺陷型突变菌株的使用，如果没有特定的培养基成分(氨基酸、嘌呤或嘧啶)，突变菌株就无法生长，因此用与突变基因互补的质粒进行转化使转化子能够在缺乏所需营养成分的培养基上生长。
本质粒含有相反方向的酵母启动子GAL1和GAL10，可以在可抑制启动子的控制下将一个或两个目的基因引入酵母宿主菌株中。在GAL10 promoter后的MCS插入目的基因时，需要目的基因带有起始密码子，而在GAL1 promoter后的MCS插入目的基因时，多克隆位点前已带有起始密码子，插入的目的基因不需要带有起始密码子。当两个基因分别插入两个MCS共表达时，可以通过免疫沉淀分析确认蛋白质-蛋白质相互作用。本质粒含有酵母2μ origin复制子，2μ origin的序列最初是从天然存在的酵母2μ质粒中分离出来，因此含有2μ origin能够在酿酒酵母中自主复制质粒。
本质粒含有氨苄青霉素(Ampicillin)抗性和URA3筛选标记。在大肠杆菌中呈现氨苄青霉素抗性。本质粒转化酵母细胞后，可利用URA3筛选标记，转化酿酒酵母Ura营养缺陷型菌株，如酿酒酵母INVSc1 (D0432)，在不含Uracil的培养基中筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA质粒(6640bp)的图谱如下：
pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA的多克隆位点的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D2894 pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA.pdf。
pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA中没有的酶切位点包括：
| AarI | AatII | AbsI | AccIII | AccB7I | AcvI | AflII |
| AleI | Aor13HI | AscI | AsiSI | AspI | AspA2I | AvrII |
| AxyI | BaeI | BalI | BbeI | BbrPI | BbvCI | BclI |
| BfrI | BlnI | BlpI | BoxI | BplI | Bpu1102I | BsaBI |
| Bse8I | Bse21I | BseAI | BseJI | BsePI | BsiWI | Bsp13I |
| Bsp68I | Bsp1720I | BspEI | BspTI | BssHII | Bst98I | BstAFI |
| BstEII | BstENI | BstHPI | BstPI | BstPAI | Bsu36I | BtuMI |
| CelII | CpoI | CsiI | CspI | DinI | Eco72I | Eco81I |
| Eco91I | EcoNI | EcoO65I | EgeI | EheI | FbaI | FseI |
| FspAI | HpaI | I-CeuI | I-PpoI | I-SceI | KasI | KflI |
| Kpn2I | Ksp22I | KspAI | MabI | MamI | MauBI | MlsI |
| MluNI | Mly113I | Mox20I | MreI | MroI | MscI | Msp20I |
| MspCI | MssI | NarI | Nb.BbvCI | NruI | Nt.BbvCI | OliI |
| PalAI | PaqCI | PasI | PauI | Pfl23II | PflFI | PflMI |
| PI-PspI | PI-SceI | PluTI | PmaCI | PmeI | PmlI | PshAI |
| PspCI | PspEI | PspLI | PsrI | PsyI | PteI | RgaI |
| RigI | RruI | RsrII | Rsr2I | SanDI | SexAI | SfaAI |
| SfiI | SfoI | SgfI | SgrAI | SgrDI | SgsI | SmiI |
| SrfI | SspDI | SwaI | Tth111I | Van91I | Vha464I | XagI |
| XmaJI | ZraI |
pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA中的单酶切位点包括：
| Acc65I | AgeI | AhdI | ApaI | BamHI | BfuA | BglII |
| BmgBI | BmtI | Bpu10I | BsaHI | BsgI | BsmI | BspDI |
| BspMI | BsrGI | BstAPI | BstXI | ClaI | CspCI | EagI |
| Eco53kI | EcoRI | EcoRV | HindIII | KpnI | MfeI | MluI |
| NaeI | NcoI | NdeI | NgoMIV | NheI | NotI | PacI |
| PaeR7I | PspOMI | PspXI | PstI | SacI | SacII | SalI |
| SbfI | SmaI | SnaBI | SpeI | SphI | StuI | TspMI |
| XbaI | XhoI | XmaI |
pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA质粒中对于插入片段进行测序时，推荐使用的正向测序引物GAL1-F、GAL10-F和反向测序引物GAL1-R、GAL10-R的序列如下：
GAL1-F (2837-2857): 5'-ATTTTCGGTTTGTATTACTTC-3'
GAL1-R (3113-3133): 5'-GTTCTTAATACTAACATAACT-3'
GAL10-F (2319-2340): 5'-GGTGGTAATGCCATGTAATATG-3'
GAL10-R (2118-2140): 5'-GGCAAGGTAGACAAGCCGACAAC-3'
pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA的全序列信息D2894 pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA全序列.txt。
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D2894-1µg | pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA | 1µg |
| D2894-100µg | pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA | 100µg |
| — | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项：本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D2881-1µg | pAOX1-MCS-His-Zeocin | 1µg |
| D2881-100µg | pAOX1-MCS-His-Zeocin | 100µg |
| D2882-1µg | pAOX1-α factor-MCS-His-Zeocin | 1µg |
| D2882-100µg | pAOX1-α factor-MCS-His-Zeocin | 100µg |
| D2883-1µg | pAOX1-MCS-His-Amp&Zeo | 1µg |
| D2883-100µg | pAOX1-MCS-His-Amp&Zeo | 100µg |
| D2884-1µg | pAOX1-α factor-MCS-His-Amp&Zeo | 1µg |
| D2884-100µg | pAOX1-α factor-MCS-His-Amp&Zeo | 100µg |
| D2892-1µg | pGAL1,10-α factor-MCS-His-MCS-Flag-URA | 1µg |
| D2892-100µg | pGAL1,10-α factor-MCS-His-MCS-Flag-URA | 100µg |
| D2894-1µg | pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA | 1µg |
| D2894-100µg | pGAL1,10-MCS-His-MCS-Flag-URA | 100µg |
| D0412 | 毕赤酵母GS115甘油菌 | 200μl |
| D0413 | 毕赤酵母KM71甘油菌 | 200μl |
| D0414 | 毕赤酵母X-33甘油菌 | 200μl |
| D0415 | 毕赤酵母SMD1168H甘油菌 | 200μl |
| D0308S | 毕赤酵母感受态细胞制备及转化试剂盒 | 50次 |
| D0308M | 毕赤酵母感受态细胞制备及转化试剂盒 | 250次 |
| D0310S | 酿酒酵母感受态细胞制备及转化试剂盒 | 50次 |
| D0310M | 酿酒酵母感受态细胞制备及转化试剂盒 | 250次 |
| D7278S | 酵母菌落PCR试剂盒(碱裂解法) | 100次 |
| D7278M | 酵母菌落PCR试剂盒(碱裂解法) | 500次 |
| D7279S | 酵母菌落PCR试剂盒(酶解法) | 100次 |
| D7279M | 酵母菌落PCR试剂盒(酶解法) | 500次 |
| D0432 | 酿酒酵母INVSc1甘油菌 | 200μl |
| ST961 | BeyoPure™ YPD Broth (premixed powder) | 10×500ml |
| ST963 | BeyoPure™ YPD Broth with Agar (premixed powder) | 10×500ml |
| ST965 | BeyoPure™ YPD Broth (YPD肉汤培养基) | 500ml |
