pRL-TK(报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行海肾萤光素酶(Renilla luciferase)报告基因检测的质粒,主要用于在其多克隆位点插入感兴趣的5’-UTR、启动子、增强子等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性,或用作萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测时的内参,从而消除因为质粒的转染效率不同而带来的误差。
pRL-TK质粒带有的HSV TK promoter (单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶启动子)相对于SV40和CMV增强子/启动子较弱,更适用于共转系统中的内参报告基因。
pRL-TK质粒携带renilla luciferase基因,编码分子量为36kD的海肾萤光素酶,翻译后无需修饰,常用于报告基因检测。
本质粒为氨苄抗性。
pRL-TK质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide |
Position |
HSV-TK promoter |
7-759 |
Multiple cloning site |
760-795 |
Chimeric intron |
862-998 |
T7 RNA polymerase transcription(-17 to +2) |
1042-1060 |
T7 RNA polymerase transcription initiation site |
1059 |
Rluc reporter gene |
1070-2005 |
SV40 late polyadenylation signal |
2047-2248 |
β-lactamase (Ampr) coding region |
2395-3255 |
pRL-TK质粒的图谱如下:
pRL-TK质粒的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2760 pRL-TK(报告基因质粒).pdf。
pRL-TK中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pRL-TK)包括:
AatII |
Acc65I |
AgeI |
AscI |
Asp718 |
BlpI |
BseRI |
BsgI |
BsiWI |
BsmBI |
BspMII |
BstEII |
BstXI |
Bsu36I |
DraIII |
Eco47III |
Eco72I |
EspI |
FseI |
KpnI |
NaeI |
NdeI |
NgoMI |
NruI |
NsiI |
PaeR7I |
PflMI |
PmeI |
PmlI |
RsrII |
SacI |
SfiI |
SnaBI |
SphI |
SplI |
pRL-TK中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pRL-TK once)包括:
BglII |
A`GATC,T |
2 |
Bsp120I |
G`GGCC,C |
791 |
MscI |
TGG|CCA |
129 |
ApaI |
G,GGCC`C |
795 |
SapI |
GCTCTTC 8/11 |
138 |
BspMI |
ACCTGC 10/14 |
853 |
BssHII |
G`CGCG,C |
242 |
NheI |
G`CTAG,C |
1061 |
PspAI |
C`CCGG,G |
283 |
XcmI |
CCANNNN,N`NNNNTGG |
1720 |
XmaI |
C`CCGG,G |
283 |
BsrGI |
T`GTAC,A |
1769 |
SmaI |
CCC|GGG |
285 |
XbaI |
T`CTAG,A |
2008 |
KasI |
G`GCGC,C |
290 |
NotI |
GC`GGCC,GC |
2015 |
NarI |
GG`CG,CC |
291 |
EagI |
C`GGCC,G |
2015 |
EheI |
GGC|GCC |
292 |
XmaIII |
C`GGCC,G |
2015 |
BbeI |
G,GCGC`C |
294 |
HpaI |
GTT|AAC |
2158 |
SacII |
CC,GC`GG |
300 |
MunI |
C`AATT,G |
2167 |
PpuMI |
RG`GWC,CY |
320 |
ClaI |
AT`CG,AT |
2253 |
AvrII |
C`CTAG,G |
323 |
BsaBI |
GATNN|NNATC |
2259 |
NcoI |
C`CATG,G |
331 |
BamHI |
G`GATC,C |
2260 |
Bst1107I |
GTA|TAC |
344 |
SspI |
AAT|ATT |
2378 |
XcaI |
GTA|TAC |
344 |
Bsp1286I |
G,DGCH`C |
2600 |
PvuII |
CAG|CTG |
532 |
PvuI |
CG,AT`CG |
2814 |
MluI |
A`CGCG,T |
714 |
EcoNI |
CCTNN`N,NNAGG |
2822 |
HindIII |
A`AGCT,T |
761 |
FspI |
TGC|GCA |
2960 |
EcoRV |
GAT|ATC |
775 |
Cfr10I |
R`CCGG,Y |
3098 |
SalI |
G`TCGA,C |
779 |
AhdI |
GACNN,N`NNGTC |
3183 |
SpeI |
A`CTAG,T |
785 |
HgiEII |
ACCNNNNNNGGT -1/13 |
3482 |
pRL-TK质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T7 Primer(1042-1060): TAATACGACTCACTATAGG
pRL-TK的全序列信息:pRL-TK全序列.txt。
包装清单:
产品编号
|
产品名称
|
包装
|
D2760-1μg
|
pRL-TK(报告基因质粒)
|
1μg
|
D2760-100μg
|
pRL-TK(报告基因质粒)
|
100μg
|
—
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说明书
|
1份
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保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。