pCMV-N-mOrange2 (橙色荧光蛋白)
收藏
产品编号 D2713-1μg
数量
¥ 888.00
产品包装:
1μg 100μg
产品简介
使用说明
说明书下载
相关产品
相关论文
产品问答

pCMV-N-mOrange2是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含mOrange2标签的融合蛋白。mOrange2蛋白是一种极其明亮的桔色荧光蛋白,与mOrange蛋白相比,其蛋白稳定性得以提高。

该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个mOrange2的完整编码序列,并且在mOrange2前面加入Kozak序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有mOrange2标签的融合蛋白。利用mOrange2的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用mOrange2抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。mOrange2与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测mOrange2,但可以尝试使用抗mcherry的抗体检测mOrange2。

该质粒为卡那霉素抗性,并含有Neomycin筛选标记,转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

pCMV-N-mOrange2质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
CMV promoter 1-602
T3 promoter and T3 primer binding site 620-639
Kozak sepuence 671-676
mOrang 677-1381
Multiple cloning site 1382-1447
T7 promoter and T7 primer binding site 1491-1512
SV40 polyA signal 1524-1907
f1 origin of ss-DNA replication 2045-2349
bla promoter 2374-2498
SV40 promoter 2518-2856
Neomycin/kanamycin resistance ORF 2891-3682
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 3683-4141
pUC origin 4270-4937

pCMV-N-mOrange2质粒(4989bp)的图谱如下:

pCMV-N-mOrange2质粒的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2713 pCMV-N-mOrange2.pdf

pCMV-N-mOrange2中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-mOrange2)包括:

AclI AhdI AleI AscI AsiSI BbsI BbvCI BcgI
BlpI BmgBI Bpu10I BsiWI BsmBI BspEI BspQI BsrGI
BssHII BstXI BstZ17I EarI EcoNI Esp3I FseI NotI
NruI PmeI PmlI PpuMI PshAI PspXI SacII SapI
SbfI ScaI SgrAI SmaI SrfI SwaI TspMI XcmI
XmaI

pCMV-N-mOrange2中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-mOrange2 once)包括:

AccI GT’MK,AC 1413 HindIII A’AGCT,T 1388
AfeI AGC|GCT 660 HpaI GTT|AAC 1784
AflII C’TTAA,G 1187 KasI G’GCGC,C 3018
AgeI A’CCGG,T 664 MfeI C’AATT,G 1771
ApaI G,GGCC’C 1446 MluI A’CGCG,T 1907
ApaLI G’TGCA,C 4623 MscI TGG|CCA 3101
AvaI C’YCGR,G 1424 NarI GG’CG,CC 3019
BaeI ,N)5’(N)10ACNNNNGTAYC(N)7,(N)5 1121 NheI G’CTAG,C 597
BamHI G’GATC,C 1382 PaeR7I C’TCGA,G 1424
BclI T’GATC,A 1678 PciI A’CATGT 4937
BglII A’GATC,T 1418 PflFI GACN’N,NGTC 3137
BmtI G,CTAG’C 601 PflMI CCAN,NNN’NTGG 1082
BsaI GGTCTCN’NNNN, 4008 PluTI G,GCGC’C 3022
BsaXI ,NNN’(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN’ 2071 PspOMI G’GGCC,C 1442
BseRI GAGGAG(N)8,NN’ 2837 PstI C’TGCA,G 1398
BsgI GTGCAG(N)14,NN’ 1356 PvuI CG,AT’CG 1524
BsoBI C’YCGR,G 1424 RsrII CG’GWC,CG 3535
BspDI AT’CG,AT 2859 SacI G,AGCT’C 3505
BstBI GCAGTG,NN’ 3701 SalI G’TCGA,C 1412
BstEII G’GTNAC,C 829 SfiI GGCCN,NNN’NGGCC 2794
BtsI GCAGTG,NN’ 1860 SfoI GGC|GCC 3020
ClaI AT’CG,AT 2859 SnaBI TAC|GTA 346
CspCI ,NN’(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN’ 382 SpeI A’CTAG,T 1436
DraIII CAC,NNN’GTG 2137 StuI AGG|CCT 2840
EagI C’GGCC,G 2925 Tth111I GACN’N,NGTC 3137
Eco53kI GAG|CTC 653 XbaI T’CTAG,A 1430
EcoRI G’AATT,C 1400 XhoI C’TCGA,G 1424
EcoRV GAT|ATC 1408 XmnI GAANN|NNTTC 807

pCMV-N-mOrange2质粒中推荐使用的测序引物序列如下:

N-mOrange2 primer (1284-1303): 5'- TGGATATTACATCACACAAT-3'

T7 primer (1491-1512): 5'- GTAATACGACTCACTATAGGGC -3'

pCMV-N-mOrange2的全序列信息:D2713序列信息.txt

pCMV-N-mOrange2质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。

图1. pCMV-N-mOrange2质粒转染HEK293T细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D2713-1µg pCMV-N-mOrange2 (橙色荧光蛋白) 1μg
D2713-100µg pCMV-N-mOrange2 (橙色荧光蛋白) 100µg
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.首次使用1µg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.100µg包装的本产品质粒浓度为0.1µg/µl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3.pCMV-N-mOrange2质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
相关产品:
产品编号 产品名称 包装
D2602-1µg pCMV-Blank 1µg
D2602-100µg pCMV-Blank 100µg
D2621-1µg pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白) 1µg
D2621-100µg pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白) 100µg
D2623-1µg pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白) 1µg
D2623-100µg pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白) 100µg
D2624-1µg pCMV-C-DsRed (红色荧光蛋白) 1µg
D2624-100µg pCMV-C-DsRed (红色荧光蛋白) 100µg
D2625-1µg pCMV-C-mOrange2(橙色荧光蛋白) 1µg
D2625-100µg pCMV-C-mOrange2(橙色荧光蛋白) 100µg
D2626-1µg pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白) 1µg
D2626-100µg pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白) 100µg
D2628-1µg pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白) 1µg
D2628-100µg pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白) 100µg
D2630-1µg pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白) 1µg
D2630-100µg pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白) 100µg
D2632-1µg pCMV-C-Flag 1µg
D2632-100µg pCMV-C-Flag 100µg
D2639-1µg pCMV-C-HA 1µg
D2639-100µg pCMV-C-HA 100µg
D2650-1µg pCMV-C-His 1µg
D2650-100µg pCMV-C-His 100µg
D2672-1µg pCMV-C-Myc 1µg
D2672-100µg pCMV-C-Myc 100µg
D2701-1µg pCMV-N-BFP (蓝色荧光蛋白) 1µg
D2701-100µg pCMV-N-BFP (蓝色荧光蛋白) 100µg
D2703-1µg pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白) 1µg
D2703-100µg pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白) 100µg
D2705-1µg pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) 1µg
D2705-100µg pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) 100µg
D2707-1µg pCMV-N-EGFP (绿色荧光蛋白) 1µg
D2707-100µg pCMV-N-EGFP (绿色荧光蛋白) 100µg
D2711-1µg pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) 1µg
D2711-100µg pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) 100µg
D2716-1µg pCMV-N-YFP (黄色荧光蛋白) 1µg
D2716-100µg pCMV-N-YFP (黄色荧光蛋白) 100µg
D2722-1µg pCMV-N-Flag 1µg
D2722-100µg pCMV-N-Flag 100µg
D2733-1µg pCMV-N-HA 1µg
D2733-100µg pCMV-N-HA 100µg
D2737-1µg pCMV-N-His 1µg
D2737-100µg pCMV-N-His 100µg
D2756-1µg pCMV-N-Myc 1µg
D2756-100µg pCMV-N-Myc 100µg
相关产品请点击如下按钮:
使用本产品的文献: