pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template (RNA体外转录质粒)
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产品编号 D2308-10μg
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¥ 1169.00
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10μg
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碧云天研发的pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template是一种用于体外基于T3、SP6或T7 Promoter进行RNA转录的线性化质粒模板。该质粒中的PstI/SacI位点反向插入了人β-actin基因的125bp cDNA片段(X00351的823-947核苷酸片段),已经用HindIII限制性内切酶进行了线性化处理,可以直接使用T3 RNA聚合酶、SP6 RNA聚合酶或T7 RNA聚合酶的任何一种进行体外转录。从本线性化模板可以转录产生与人β-actin mRNA互补的RNA探针,也可以用于测定T3 RNA聚合酶、SP6 RNA聚合酶或T7 RNA聚合酶的活性。

当使用T3 RNA聚合酶、SP6 RNA聚合酶或T7 RNA聚合酶进行体外转录时,获得的RNA的长度分别为221nt、198nt和175nt。推荐使用碧云天生产的R7006 SP6 RNA PolymeraseR7009 T3 RNA PolymeraseR7012 T7 RNA Polymerase

从该模板合成的转录产物可用作核糖核酸酶和S1核酸酶保护试验的探针;在Northern和Dot blots中可作为内参或用于建立每个样品中RNA相对量的参考;与人总RNA杂交可保护人β-actin mRNA的125个核苷酸片段不被RNase A和RNase T1消化。

pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
Ampicillin promoter 96-200
Ampicillin resistance ORF 201-1061
ori 1232-1820
lac promoter 2144-2174
lac operator 2182-2198
M13 reverse primer binding site 2206-2222
T3 promoter 2238-2257
SP6 promoter 2261-2280
T7 promoter 2284-2303
β-actin-125-Human Antisense Template 2327-2451
Multiple cloning site 2307-2326/2452-2480
M13 forward primer binding site 2484-2500

pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template质粒(2878bp)的图谱如下:

pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template的多克隆位点的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2308 pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template (RNA体外转录质粒).pdf

pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template)包括:

AccI AfeI AflII AgeI AleI ApaI AscI
AsiSI AvrII BaeI BbsI BbvCI BclI BfuAI
BglII BlpI BmtI Bpu10I BsaAI BsaBI BseRI
BsgI BsiWI BsmFI BsmI BspDI BspEI BspMI
BsrGI BssHII BstBI BstEII BstXI BstZ17I Bsu36I
BtgZI ClaI CspCI DraIII EcoNI EcoRV FseI
HincII HpaI HindIII MfeI MluI MscI NaeI
NcoI NgoMIV NheI NruI NsiI PacI PaeR7I
PaqCI PflFI PflMI PmeI PmlI PpuMI PshAI
PsiI PspOMI PspXI RsrII SalI SbfI SexAI
SfiI SgrAI SnaBI SpeI SphI SrfI StuI
StyI SwaI Tth111I XcmI XhoI

pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template)包括:

AatII G,ACGT`C 65 KasI G`GCGC,C 2639
Acc65I G`GTAC,C 2315 KpnI G,GTAC`C 2135
AflIII A`CRYG,T 1876 NarI GG`CG,CC 2640
AhdI GACNN,N`NNGTC 987 NdeI CA`TA,TG 2692
AlwNI CAG,NNN`CTG 1464 NmeAIII GCCGAG(N)19,NN` 838
AvaI C`YCGR,G 2458 NotI GC`GGCC,GC 2308
BamHI G`GATC,C 2463 PciI A`CATG,T 838
BanII G,RGCY`C 2452 PluTI G,GCGC`C 2308
BcgI ,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` 450 PstI C,TGCA`G 1876
BmgBI CAC|GTC 2374 SacI G,AGCT`C 2639
BpmI CTGGAG(N)14,NN` 917 SacII CC,GC`GG 2321
BsaI GGTCTCN`NNNN, 922 SapI GCTCTTCN`NNN, 2452
BsaXI ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` 2008 ScaI AGT|ACT 2312
BseYI C`CCAG,C 1527 SfoI GGC|GCC 1993
BsoBI C`YCGR,G 2458 SmaI CCC|GGG 507
BspQI GCTCTTCN`NNN, 1993 SspI AAT|ATT 2461
BsrFI R`CCGG,Y 903 TspMI C`CCGG,G 2460
BstAPI GCAN,NNN`NTGC 2693 XbaI T`CTAG,A 183
BtgI C`CRYG,G 2311 XmaI C`CCGG,G 2458
EagI C`GGCC,G 2308 XmnI GAANN`NNTTC 388
Eco53kI GAG|CTC 2454 ZraI GAC|GTC 67
EcoO109I RG`GNC,CY 8
EcoRI G`AATT,C 2232

pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template的全序列信息:D2308 pT3_SP6_T7 RNA Template (Linearized)全序列.txt

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D2308-10µg pT3/SP6/T7-RNA Linearized Template 10μg
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

如果用于制备RNA探针并用于RNase Protection Assay (RPA)实验,即Nuclease Protection Assay (NPA)实验,建议对制备的RNA探针进行PAGE纯化。

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.10µg包装的本产品质粒浓度为0.5µg/µl,共20µl。可以直接用于体外转录反应,具体的转录反应体系可以参考碧云天生产的T7 RNA Polymerase (R7012)SP6 RNA Polymerase (R7006)T3 RNA Polymerase (R7009)的产品说明书。
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