pGL6-CMV-Luc (报告基因质粒)即pGL6-CMV-Luc Reporter Gene Plasmid,是以碧云天的pGL6报告基因质粒为模板,在其多克隆位点插入CMV启动子,从而构建成能组成型高表达萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)的报告基因质粒。本质粒常用作阳性对照或者海肾萤光素酶(Renilla luciferase)报告基因的内参,也常被用于萤光素酶基因标记的肿瘤细胞系的构建及后续用于肿瘤细胞的示踪或活体生物发光成像。
pGL6报告基因质粒是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
pGL6-CMV-Luc质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 29-538 |
Luc2 reporter gene | 585-2237 |
SV40 polyA signal | 2281-2402 |
SV40 promoter | 2596-2953 |
Neomycin resistance ORF | 2984-3778 |
Synthetic poly(A) signal | 3803-3851 |
ori | 4178-4766 |
Ampicillin resistance ORF | 4966-5826 |
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 5931-6084 |
pGL6-CMV-Luc (6084bp)的图谱如下:
pGL6-CMV-Luc表达基因的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2091 pGL6-CMV-Luc (报告基因质粒).pdf
pGL6-CMV-Luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pGL6-CMV-Luc)包括:
AbsI | AccIII | AccB7I | AclI | AcvI | AflII | AjiI |
AjuI | AloI | Aor13HI | AscI | AseI | AsiSI | AspI |
Asp700I | AsuNHI | BarI | BbrPI | BfrI | BglII | BmgBI |
BmtI | BsaI | BsaXI | BseAI | BsePI | BsiWI | Bso31I |
Bsp13I | Bsp68I | BspEI | BspOI | BspTI | BspTNI | BssHII |
Bst98I | BstAFI | BtrI | BtuMI | Cfr9I | CpoI | CspI |
Eco31I | Eco32I | Eco72I | EcoRI | EcoRV | FspAI | I-CeuI |
I-PpoI | I-SceI | KflI | Kpn2I | MauBI | MluI | MroI |
MroXI | MspCI | MssI | NheI | NruI | PacI | PaeR7I |
PalAI | PasI | PauI | PdmI | Pfl23II | PflFI | PflMI |
PfoI | PI-PspI | PI-SceI | PmaCI | PmeI | PmlI | PshBI |
Psp1406I | PspCI | PspLI | PspXI | PsrI | PsyI | PteI |
RgaI | RruI | RsrII | Rsr2I | SanDI | SbfI | SdaI |
SfaAI | Sfr274I | SgfI | SgrDI | SgsI | SlaI | SmaI |
SmiI | SrfI | Sse8387I | SwaI | TspMI | Tth111I | Van91I |
Vha464I | VspI | XcmI | XhoI | XmaI | XmaCI | XmnI |
pGL6-CMV-Luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pGL6-CMV-Luc)包括:
Acc65I | G`GTAC,C | 14 | Esp3I | CGTCTCN`NNNN, | 5881 |
AflIII | C`TTAA,G | 4117 | HindIII | A`AGCT,T | 550 |
AhdI | GACNN,N`NNGTC | 5039 | KpnI | G,GTAC`C | 18 |
ApaLI | G`TGCA,C | 4431 | MfeI | C`AATT,G | 2411 |
ApoI | R`AATT,Y | 2347 | NdeI | CA`TA,TG | 204 |
BamHI | G`GATC,C | 2504 | NotI | GC`GGCC,GC | 4937 |
BciVI | GTATCC(N)5,N` | 4320 | PciI | A`CATG,T | 4117 |
BpmI | CTGGAG 22/20 | 1965 | PsiI | A`CATG,T | 2382 |
BsmBI | CGTCTC 7/11 | 5881 | PstI | C,TGCA`G | 4961 |
BsrGI | T`GTAC,A | 1075 | PvuI | CG,AT`CG | 5409 |
BstBI | TT`CG,AA | 3854 | SacI | G,AGCT`C | 538 |
BstEII | G`GTNAC,C | 4964 | SacII | CC,GC`GG | 5433 |
BstXI | CCAN,NNNN`NTGG | 4961 | SalI | G`TCGA,C | 3867 |
Bsu36I | CC`TNA,GG | 5395 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 8 |
DraIII | CAC,NNN`GTG | 1731 | SnaBI | TAC|GTA | 310 |
Eco53kI | GAG|CTC | 536 | SpeI | A`CTAG,T | 5868 |
EcoNI | CCTNN`N,NNAGG | 3458 | StuI | AGG|CCT | 2937 |
pGL6-CMV-Luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
CMV-F (489-508): 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGT-3'
EBV-R (2311-2292): 5'-GTGGTTTGTCCAAACTCATC-3'
pGL6-CMV-Luc的全序列信息: D2091 pGL6-CMV-Luc (报告基因质粒).txt。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2091-1µg | pGL6-CMV-Luc (报告基因质粒) | 1μg |
D2091-100µg | pGL6-CMV-Luc (报告基因质粒) | 100µg |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项:本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2102-1μg | pGL6 (报告基因质粒) | 1μg |
D2102-100μg | pGL6 (报告基因质粒) | 100μg |
D2105-1μg | pGL6-TA (报告基因质粒) | 1μg |
D2105-100μg | pGL6-TA (报告基因质粒) | 100μg |
D2106-1μg | pGL6-miR (报告基因质粒) | 1μg |
D2106-100μg | pGL6-miR (报告基因质粒) | 100μg |
D2098-1μg | pGLuc (报告基因质粒) | 1μg |
D2098-100μg | pGLuc (报告基因质粒) | 100μg |