C58C1发根农杆菌甘油菌(转基因植物构建用)
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产品编号 D0396
数量
¥ 125.00
产品包装:
200μl
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碧云天生产的C58C1发根农杆菌甘油菌(转基因植物构建用),C58C1 agrobacterium rhizobiaceae glycerol stock for construction of transgenic plant是收集生长在对数期的C58C1发根农杆菌,加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。本甘油菌可以直接划平板或小量、大量培养,常用于转基因植物用菌株的构建。本菌株适用于蔷薇科,夹竹桃科,豆科,茄科,黄芩,烟草等植物的转基因操作。

发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。C58C1发根农杆菌菌株含有pRiA4b农杆碱型Ri质粒,同时具有链霉素,利福平抗性。

C58C1发根农杆菌菌株基因型:Agrobacterium rhizogenes (strRrifR) pRiA4b (agropine type)

本菌株可以使用常规的TY培养基进行培养。

关于碧云天不同甘油菌菌种的比较和选择,可参考我们的相关网页:http://www.beyotime.com/support/strain.htm

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D0396 C58C1发根农杆菌甘油菌(转基因植物构建用) 200μl
说明书 1份
保存条件:

-80℃保存,至少2年有效。需注意避免反复冻融。

注意事项:

使用本甘油菌时可以不必完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下,菌体会逐渐沉淀至管底,请务必注意适当混匀后使用。

为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.划平板接种:
取出甘油菌置于冰上,并置于超净台内,后续操作都在超净台内操作。
a.用镊子和塑料枪头操作:镊子的顶端在70%酒精中蘸一下,并且在酒精灯上略略烧一下,使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的200µl塑料枪头,蘸取少量甘油菌,然后把蘸有菌液的塑料枪头,以尽量和TY平板接近平行的角度,在含34μg/ml利福平和50μg/ml链霉素的TY平板上连续作S形或Z形划动,再用一无菌的200µl塑料枪头,在原先的划线上以90º或120º角,再在TY平板上连续作S形或Z形划动。通常换枪头重复操作2-3次即可。28-30℃,倒置培养2-3天。
b.用接种环操作:将接种环在酒精灯上略略烧一下,使接种环处于无菌状态。微冷后,蘸取少量甘油菌,在含34μg/ml利福平和50μg/ml链霉素的TY平板上连续作S形或Z形划动。把接种环再烧一下,微冷后,在原先的划线上以90º或120º角,再在TY平板上连续作S形或Z形划动。通常用接种环重复操作2-3次即可。28-30℃,倒置培养2-3天。
2.直接培养:
取出甘油菌置于冰上,并置于超净台内,后续操作都在超净台内操作。把镊子的顶端在70%酒精中蘸一下,并且在酒精灯上略略烧一下,使镊子的顶端处于无菌状态。用镊子夹取一个无菌的塑料枪头或牙签,蘸取甘油菌,然后把蘸有菌液的塑料枪头或牙签放到装有3ml TY (含34μg/ml利福平和50μg/ml链霉素)的细菌培养试管内或装有100ml或更大体积TY (含34μg/ml利福平和50μg/ml链霉素)的细菌培养瓶内。28-30℃,约200rpm培养至少24h。
3.感受态细菌的制备:
可以使用碧云天的农杆菌感受态制备试剂盒(D0303)进行感受态细胞的制备。
4.TY配方(1L):
a)称取Tryptone 5g和Yeast extract 3g,补水到1L体积,完全溶解后,121℃、20min高温灭菌;
b)配制1M的CaCl2水溶液,121℃、20min高温灭菌;
c)每1L灭菌的TY液体营养液中加入10ml无菌的1M CaCl2水溶液即可。
d)若配制TY固体培养基,则加入15g琼脂粉。
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