碧云天的BeyoGel™ TBE PAGE预制胶(BeyoGel™ TBE Precast PAGE Gel)是一种使用安全、便捷、高品质的常规尺寸聚丙烯酰胺非变性预制凝胶,主要用于10-3000bp双链核酸或10-3000nt单链核酸的高分辨率电泳分析或纯化,广泛用于限制性酶切产物、PCR产物、Southern和引物分析等的实验。本预制胶有1.5厘米高的浓缩胶,具有非常优良的分离效果,电泳后DNA条带平整、清晰、细腻、锐利,几乎没有边缘效应;本预制胶胶板为玻璃材质,电泳效果非常好,达到甚至超过了自配TBE PAGE胶的电泳效果。
碧云天的BeyoGel™ TBE PAGE预制胶提供不同浓度的梯度胶和固定浓度胶,并有10孔和15孔两种孔数选择。固定浓度胶包括5%、10%、12%和15%;梯度胶浓度为4-20%。如果有较大量的特殊浓度需求,碧云天可提供定制服务。每种预制胶的最佳分离范围请参考下表:
产品编号 | 预制胶浓度 | 孔数 | 最大上样量 | 电泳缓冲液 | 最佳分离范围 | 溴酚蓝前沿位置 |
D0171/D0172 | 5% | 10/15 | 60/30μl | 1X TBE | ~200bp-2kb | ~70±5 bp |
D0174/D0175 | 10% | 10/15 | 60/30μl | 1X TBE | ~50bp-1.5kb | ~35±5 bp |
D0177/D0178 | 12% | 10/15 | 60/30μl | 1X TBE | ~30bp-1.2kb | ~30±5 bp |
D0182/D0183 | 15% | 10/15 | 60/30μl | 1X TBE | ~20bp-1kb | ~20±5 bp |
D0185/D0186 | 4-20% | 10/15 | 60/30μl | 1X TBE | ~10bp-3kb | ~15±5 bp |
本预制胶含有1.5厘米高的4%浓缩胶,可以有效确保获得非常锐利的条带。
本预制胶丙烯酰胺(Acrylamide)与甲叉丙烯酰胺(Bisacrylamide)的比例为29:1,凝胶厚度为1.5mm。加样孔数为10孔的最大上样量为60μl,加样孔数为15孔的最大上样量为30μl。胶板尺寸:宽×高×厚度为98×84×4.1mm;凝胶尺寸:宽×高×厚度为81×74×1.5mm。
聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)技术广泛用于蛋白质、核酸及蛋白质-核酸复合物的分离纯化、检测、鉴定、分子量分析等实验,是生命科学研究中最基本的实验技术之一。常见的Western印迹(Western blot)检测就是基于PAGE的。
核酸电泳通常是基于长度来电泳分离DNA或RNA片段的分析技术。将待分析的核酸样品置于凝胶中,核酸由于其糖磷酸主链带负电在电场的作用下向阳极迁移。不同大小的片段能够通过在凝胶中的迁移速度差异来完成分离,较长的分子迁移速度较慢,因为它们在凝胶中的阻力较大。由于分子的大小影响其迁移速度,在一定的时间内,较短的片段比较长的片段更接近阳极[1]。在核酸电泳实验中,常用的有两种凝胶:琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。与琼脂糖凝胶相比,聚丙烯酰胺凝胶具有更高分辨率和灵敏度、低本底染色、所需样品量较少、高效印迹、易于从凝胶中提取DNA、不干扰酶反应以及准确性和可重复性高等优点[2]。常用于核酸电泳的PAGE凝胶有TBE PAGE凝胶、TBE-Urea PAGE凝胶[3]和EMSA PAGE凝胶等。其中,TBE PAGE凝胶由TBE缓冲液(Tris-硼酸-EDTA)制备,主要用于核酸的非变性电泳,常应用于DNA或RNA片段的高分辨率分析,包括限制性酶切产物、PCR产物、Southern和引物等的分析等实验。
碧云天的BeyoGel™ TBE PAGE预制胶由高纯度的Tris、硼酸、EDTA等试剂制备,缓冲能力强,适合长时间电泳,且分辨率高、分离效果佳。严格的质量控制可确保凝胶和缓冲液中无DNase和RNase。
本预制胶使用常用的TBE电泳液,推荐使用碧云天TBE (1X premixed powder) (ST720/ST721)、TBE (5X premixed powder) (ST723)以及TBE (5X) (ST718),或参考使用说明自行配制相应的电泳液。
关于10孔和15孔预制胶的选择:需要检测的样品数量多或者需要定量时,推荐使用15孔预制胶,通量更大、更便于进行较多样品的定量统计分析;需要获得非常漂亮的代表性图片时,推荐使用10孔预制胶,10孔预制胶获得的条带更加平整和锐利。
本产品使用安全、便捷。本预制胶无需配制,即开即用,去掉梳子即可上样,而传统的TBE PAGE配制凝胶繁琐费时,并且制胶时还会接触有毒和刺激性试剂。
本产品质量稳定。本预制胶采用高品质玻璃胶板,和塑料胶板相比,大大减少了胶板对核酸的吸附,电泳效果更好。本产品流水线灌注,品质稳定可靠,重复性好,不同批次的产品一致性高。
本产品电泳效果好。本预制胶的核酸分离效果极佳,核酸条带平整、清晰、细腻、锐利。
本产品电泳槽兼容性好。本预制胶兼容市场上主流的小型电泳槽,如碧云天的MiniProGel™蛋白制胶与电泳系统(E6001/E6005)、Bio-Rad公司的Mini-PROTEAN® Tetra Cell电泳槽、Life公司的XCell SureLock® Mini-Cell电泳槽(需与碧云天可免费提供的特制挡板配合使用)、以及上海天能、北京六一等的mini胶电泳槽或其它胶板宽度在10厘米的电泳槽。
本产品电泳时间短。本预制胶推荐的电泳电压和电泳时间为150V 50-75分钟,即可完成电泳并获得非常平整和锐利的电泳条带。具体的电泳时间取决于凝胶浓度。
本产品取出凝胶极为便捷。只需用刀片在玻璃胶板一侧轻轻划一下即可,并且玻璃胶板打开极为方便,无需特殊的起撬工具。
本预制胶属于特殊用途预制胶。碧云天的特殊用途预制胶的比较和选择可以参考碧云天的相关网页:
http://www.beyotime.com/support/special-precast-page-gel.htm。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0183S | BeyoGel™ TBE PAGE预制胶(15%, 15孔) | 10块 |
- | 说明书 | 1份 |
4℃保存,1-2个月有效。切勿置于0℃以下冷冻。
注意事项:由于本预制胶保质期较短,需新鲜制备,在您确认订购后约3-5个工作日才能发货。
本预制胶不能置于0℃以下冷冻,否则凝胶会冻裂。
电泳液建议新鲜配制,试剂纯度不够、反复使用或长期放置的缓冲液会降低电泳效果。电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲性能下降,可能使电泳产生条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。
本预制胶为了兼容几乎所有厂家的小型凝胶电泳槽,所以改进了与电泳槽U型硅橡胶密封条的吻合结构(如碧云天、Bio-Rad等公司的电泳槽)。建议在电泳时须将具有突起结构的U型硅橡胶密封条取出后反过来安装,使其没有突起的平滑面朝外,从而防止漏液,见下图。一般内槽电泳液加满,外槽电泳液没过电泳槽底部的阳极即可,并且电泳结束后的电泳缓冲液可以作为外槽缓冲液重复使用1-2次。另外,部分公司都已经配套无突起结构的U型硅橡胶密封条,使用这样的U型硅橡胶密封条就不会出现内外槽之间的漏液现象。
图1. 碧云天、Bio-Rad等公司的电泳槽U型硅橡胶密封条的突起结构图。由于碧云天的BeyoGel™ PAGE预制胶的该部位是平的,使其兼容几乎所有厂家的小型胶电泳槽,所以电泳时须将具有突起结构的硅橡胶密封条(左图)取出后反过来安装(右图),使其没有突起的平滑面朝外,从而防止漏液。
由于碧云天的BeyoGel™ PAGE预制胶比Life公司的XCell SureLock® Mini-Cell电泳槽配套的NuPAGE® Gel或Novex® Mini Gel略薄,所以需加特制挡板配合使用。如有需要,请在订购本产品时告知,碧云天会免费赠送该特制挡板。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。