碧云天的BeyoMag™磁珠法质粒小量抽提试剂盒(Plasmid Mini Preparation Kit with Magnetic Beads)是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠,用于稳定、高效、便捷地从大肠杆菌中抽提小量质粒的试剂盒。
本试剂盒抽提所得的质粒可直接用于细胞转染、DNA测序、PCR、基于PCR的突变、体外转录、转化细菌、内切酶消化等实验。
本试剂盒的原理和主要操作过程如图1所示。利用碱裂解法使质粒充分释放,再与磁珠特异性结合,在外界磁场(如磁分离架)的作用下,磁珠与相应溶液可以快速而高效地分离,经洗涤充分去除杂质,最后用洗脱液将质粒从磁珠上洗脱下来,即可获得高质量的质粒样品。
图1. BeyoMag™磁珠法质粒小量抽提试剂盒抽提原理示意图。
本试剂盒具有抽提效果稳定、纯度高、操作灵活便捷等优点。本试剂盒的质粒抽提体系经过反复测试和优化,能从2-3ml过夜培养的大肠杆菌中抽提得到约10-15µg高拷贝质粒。最快约20分钟内即可完成质粒抽提。按照标准的操作步骤,本试剂盒适用于1-5ml过夜培养菌液的质粒抽提。由于磁珠的使用量可灵活调节,如进行中量质粒的提取,只需将抽提体系按比例放大即可,例如放大1倍。
目前质粒抽提的方法主要为柱纯化法,该方法通常需要反复离心,或者需要特殊的抽滤装置,而且柱纯化过程中的纤维切割对质粒的超螺旋状态有一定的影响。而磁珠法条件温和,整个操作步骤无需繁琐的反复离心或抽滤操作,而以简单的磁铁吸附所代替,因而确保了操作的快速和便捷。
本试剂盒和传统的抽提方法相比,操作过程中不涉及酚/氯仿等有毒试剂。
本试剂盒小包装可用于50次质粒小量抽提,中包装可用于200次质粒小量抽提,大包装可用于1000次质粒小量抽提。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0075S-1 | BeyoMag™磁珠 | 2.5ml |
D0075S-2 | 溶液I (悬浮液) | 10ml |
D0075S-3 | 溶液II (裂解液) | 10ml |
D0075S-4 | 溶液III (结合液) | 10ml |
D0075S-5 | 溶液IV (洗涤液) | 30ml(第一次使用前加入45ml无水乙醇) |
D0075S-6 | 溶液V (洗脱液) | 5ml |
D0075S-7 | RNase A (100mg/ml) | 10µl |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0075M-1 | BeyoMag™磁珠 | 10ml |
D0075M-2 | 溶液I (悬浮液) | 40ml |
D0075M-3 | 溶液II (裂解液) | 40ml |
D0075M-4 | 溶液III (结合液) | 40ml |
D0075M-5 | 溶液IV (洗涤液) | 50ml×2 (第一次使用前每瓶加入75ml无水乙醇) |
D0075M-6 | 溶液V (洗脱液) | 20ml |
D0075M-7 | RNase A (100mg/ml) | 40µl |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0075L | BeyoMag™磁珠法质粒小量抽提试剂盒 | D0075M×5 |
— | 说明书 | 1份 |
室温保存,一年有效。其中BeyoMag™磁珠长期不使用时,可以4℃保存,4℃可以保存更长时间。
注意事项:需自备无水乙醇和磁分离装置,推荐使用碧云天的12孔磁力架(FMS012)或24孔磁力架(FMS024)。
第一次使用前把试剂盒提供的RNase A全部加到溶液I (悬浮液)中,混匀,并在瓶上做好标记。加入RNase A后4℃存放。
第一次使用前在每瓶溶液IV (洗涤液)中加入指定量的无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
磁珠在静置后会发生沉降,使用前一定要适当涡旋震荡或颠倒数次至充分混匀。
磁分离前应适度震荡离心管使磁珠充分分散后再靠近磁场。如果出现磁珠挂壁现象,可以在磁珠聚集后晃动管内液体,使挂壁的磁珠流下。
请使用推荐的菌液量。如果菌液量过大,可能造成磁珠聚集,会影响洗涤进而影响抽提获得的质粒纯度。发生磁珠聚集时,洗涤时需尽量分散磁珠,这样可有效改善抽提效果。如果发生磁珠聚集现象,建议在后续实验中适当减少菌液用量。
温度较低时,溶液II (裂解液)与溶液III (结合液)可能会有沉淀产生。使用前必须检查一遍。如有沉淀,可置于37℃水浴加热溶解,混匀后使用。
溶液II (裂解液)请勿过分剧烈混匀,否则会产生大量气泡,使用完毕后,一定要盖紧瓶盖,防止被空气中二氧化碳酸化。
本产品适用于手工抽提,也可用于工作站或核酸自动提取仪。
抽提获得的质粒量会受质粒拷贝数等因素影响。抽提获得的质粒DNA的OD值也会因菌种不同等原因而略有波动。
溶液II (裂解液)、溶液III (结合液)及溶液IV对人体有刺激性,操作时请小心,并注意适当防护。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0075S | BeyoMag™磁珠法质粒小量抽提试剂盒 | 50次 |
D0075M | BeyoMag™磁珠法质粒小量抽提试剂盒 | 200次 |
FAD008 | 八通道吸液适配器 | 1个 |
FMS012 | BeyoMag™磁分离架(12孔) | 1个 |
FMS024 | BeyoMag™磁分离架(24孔) | 1个 |
FMS096 | BeyoMag™磁分离架(96孔) | 1个 |