BeyoMag™磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒
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产品编号 D0041S
数量
¥ 237.00
产品包装:
50次 200次
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碧云天的BeyoMag™磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒(PCR Clean Up Kit/DNA Purification Kit with Magnetic Beads)是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠,用于稳定、高效、便捷地从PCR产物或从多种DNA反应体系中提取纯化DNA的试剂盒。

本试剂盒适用于PCR反应后去除引物、酶、矿物油、甘油、盐等杂质;也同样适用于酶切、连接、磷酸化、补平或切平、随机引物等反应后的DNA纯化。所得DNA可直接用于酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。

本试剂盒的原理和主要操作过程如图1所示。样品中的DNA与磁珠特异性结合,在外界磁场(如磁分离架)的作用下,磁珠与相应溶液可以快速而高效地分离,经洗涤充分除杂质,最后用洗脱液将DNA从磁珠上洗脱下来,即可获得高度纯化的DNA样品。

图1.BeyoMag™磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒的纯化原理示意图。

本试剂盒具有效果稳定、纯度好、操作灵活便捷、可纯化DNA片段大小范围广等优点。根据实际状况灵活调节磁珠用量,通常15分钟内即可完成纯化。适用于100bp以上DNA片段的纯化,对达到10kb片段DNA的纯化也能保持较好的效果,对长至30个碱基的引物可被完全去除。通常回收率达到90%以上。本试剂盒也适用于低浓度样品的浓缩。本试剂盒的纯化效果请参见图2。

图2.BeyoMag™磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒的纯化效果图。DNA Marker (D0110)、酶切产物或PCR产物经本试剂盒纯化前后的比较。注:M:Marker;B (before):纯化前;A (after):纯化后。实际纯化效果会因实验条件、操作等而存在一定差异,本图仅供参考。

目前DNA纯化的方法主要为柱纯化试剂盒法。该方法通常需要反复离心,或者需要特殊的抽滤装置,而且柱纯化过程中的纤维切割对大片段DNA回收不太有利。而磁珠法条件温和,整个操作步骤无需繁琐的反复离心或抽滤操作,而以简单的磁铁吸附所代替,因而确保了操作的快速和便捷。

本试剂盒和传统的纯化方法相比,操作过程中不涉及酚/氯仿等有毒试剂。

对于体积不超过400微升的PCR产物或DNA样品,本试剂盒的小包装(S)和中包装(M)分别可用于50次和200次PCR产物或DNA样品的纯化。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D0041S-1 BeyoMag™磁珠 1.5ml
D0041S-2 溶液I (结合液) 20ml
D0041S-3 溶液II (洗涤液) 26ml (第一次使用前加入39ml乙醇)
D0041S-4 溶液III (洗脱液) 5ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
D0041M-1 BeyoMag™磁珠 6ml
D0041M-2 溶液I (结合液) 80ml
D0041M-3 溶液II (洗涤液) 52ml×2(第一次使用前每瓶加入78ml乙醇)
D0041M-4 溶液III (洗脱液) 20ml
说明书 1份
保存条件:

室温保存,一年有效。其中BeyoMag™磁珠长期不使用时,可以4℃保存,4℃可以保存更长时间。

注意事项:

需自备无水乙醇和磁分离装置,推荐使用碧云天的BeyoMag™磁分离架系列产品(FMS004FMS008FMS012FMS016FMS024)。

第一次使用前在每瓶溶液II (洗涤液)中加入指定量的无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。

磁珠悬液在静置后会发生沉降,使用前一定要涡旋震荡或颠倒数次至充分混匀。

磁分离前应适度震荡离心管使磁珠充分分散后再靠近磁场。如果出现磁珠挂壁现象,可以在磁珠聚集后晃动管内液体,使挂壁的磁珠流下。

温度较低时,溶液I (结合液)可能会有沉淀产生。使用前必须检查一遍。如有沉淀,可置37℃水浴加热溶解,混匀后使用。

本产品适用于手工抽提,也可用于工作站或核酸自动提取仪。

可用去离子水代替洗脱液进行洗脱,但去离子水的pH不应低于6.5,如偏低可用低浓度NaOH溶液调节至7.5-8.5。

溶液I (结合液)对人体有一定的刺激性,操作时请小心,并注意适当防护。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.加入等体积的溶液I (结合液),颠倒混匀。例如DNA样品体积为100微升,则加100微升溶液I (结合液)。
2.根据样品体积,参照下表用量加入BeyoMag™磁珠悬液(使用前务必混匀),颠倒混匀后,室温放置3-5分钟。将离心管置于磁力架的磁场中,待磁珠完全聚集后,小心吸除残液。
注意:磁珠在使用前一定要涡旋或震荡混匀。如有必要,可适当增加磁珠用量,延长结合时间以提高得率。
样品体积(µl) 磁珠用量(µl) 第一次洗涤液用量(µl) 第二次洗涤液用量(µl) 洗脱液用量(µl)
10-100 10 250 500 20-30
100-250 20 500 500 40-50
250-500 30 750 500 60-80
500-800 40 1000 500 80-100
3.参照上表,通常加入250-750µl溶液II (洗涤液),轻柔震荡使磁珠分散开,颠倒2次后将离心管置于磁力架的磁场中,待磁珠完全聚集后,小心吸除残液。
注意:如果离心管内盖有磁珠,可按住离心管整体上下颠倒两次,使磁珠被完全吸附,然后弃去上清。洗涤液用量可随磁珠的用量适当增减。通常洗涤液用量为磁珠用量的25倍左右,即20µl磁珠加入500µl洗涤液,30µl磁珠加入750µl洗涤液。
4.加入500µl溶液II (洗涤液),重复3的操作,最终尽量吸净残留液体。
5.将离心管置于37℃鼓风烘箱5分钟,或室温放置5-10分钟,确保残留的乙醇等微量液体完全挥发。
6.参照上表,加入20-100μl溶液III (洗脱液),轻柔震荡使磁珠悬于溶液中,室温孵育3-5分钟,其间甩动离心管2-3次。将离心管置于磁场中,待磁珠完全聚集后,小心吸取溶液至新离心管中,置于-20℃保存,所得溶液即为纯化的DNA样品。
注意:洗脱液的用量可参考步骤2后表格,其用量一般随磁珠用量增加而相应增加,为提高洗脱效率,通常不少于磁珠用量的2倍。为提高样品浓度,也可适当减少洗脱液用量。约50-55℃洗脱比室温洗脱效率略高。
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