碧云天生产的AO/PI细胞活性检测试剂盒(荧光显微镜专用),即AO/PI Cell Viability Assay Kit for Fluorescence Microscope,是由吖啶橙(Acridine orange, AO)染色液和碘化丙锭(Propidium iodide, PI)染色液优化比例混合而成,基于DNA探针双染细胞核,快速、便捷检测细胞活性的试剂盒。
AO是经典的、极灵敏的特异染性荧光染料,可以标记DNA、RNA。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使DNA和RNA染色,因此AO常用于细胞内DNA和RNA的荧光染色检测。AO与核酸结合方式主要有两种,分别为插入性结合和静电吸引。插入性结合是指AO嵌入DNA双链的碱基对之间,荧光发射峰为530nm,激发后呈绿色荧光。静电吸引是指带正电荷的AO与RNA或单链DNA的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,其荧光发射峰为640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。本试剂盒中AO与核酸结合的方式是插入性结合,因此激发后呈绿色荧光。经AO染色后,正常细胞的细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体,AO使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。
PI是一种非细胞膜通透性荧光染料,与DNA结合后的最大激发光波长为535nm,最大发射光波长为617nm,不能穿过具有生物活性的细胞质膜,只能对于坏死细胞因为其细胞膜缺乏完整性而能到达细胞核[1, 2],并嵌入坏死细胞的DNA双螺旋形成PI-DNA复合物从而产生红色荧光,因此PI仅能对坏死细胞染色,因此被用来区分正常细胞与坏死细胞。须特别注意凋亡细胞会因为其细胞膜的完整性,而无法被PI染色,仅在凋亡后期发生继发性坏死(Secondary necrosis)时,才能被PI染色。
图1. 碧云天AO/PI细胞活性检测试剂盒(荧光显微镜专用) (C2017)对HeLa细胞染色的效果图。图中绿色荧光表示活细胞,红色荧光表示坏死细胞。实际效果会因实验条件、操作等而存在一定差异,本图仅供参考。
本试剂盒操作简单,检测速度快。本试剂盒提供即用型的AO/PI细胞活性检测试剂,使用时,仅需取适量与细胞样品混合即可。无需制备和稀释各种溶液的繁琐过程,免去制备和稀释过程中可能产生的误差,提高了检测的精确度。
以96孔板为例,按照每个样品使用100μl AO/PI细胞活性检测试剂计算,本试剂盒每1ml可以进行10次检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C2017S | AO/PI细胞活性检测试剂 | 5ml |
C2017M | AO/PI细胞活性检测试剂 | 25ml |
— | 说明书 | 1份 |
4ºC避光保存,一年有效。-20ºC避光保存,可以保存更长时间。室温避光保存,一个月有效。
注意事项:荧光染料均存在淬灭问题,请注意避光,以减缓荧光淬灭。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0011 | 台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒 | 100次 |
C0233 | 吖啶橙染色试剂盒 | 100-1000/500-5000次 |
C1313 | 台盼蓝染色液(2X, 细胞计数仪专用) | 1/5/25ml |
C2017 | AO/PI细胞活性检测试剂盒(荧光显微镜专用) | 50/250次 |
C2019A | AO/PI双染试剂盒(Set A, 细胞计数仪专用) | 100/500次 |
C2019B | AO/PI双染试剂盒(Set B, 细胞计数仪专用) | 100/500次 |
C2019C | AO/PI双染试剂盒(Set C, 细胞计数仪专用) | 100/500次 |
C2021S | AO/PI双染试剂盒(测试装, 细胞计数仪专用) | 4×1ml |