碧云天的Beyo3D™ Mito-Tracker Red CMXRos染色液(1000X) (Beyo3D™ Mito-Tracker Red CMXRos Staining Solution, 1000X),是一种快速、便捷的用于3D培养的细胞球或类器官等的活细胞线粒体染色和线粒体膜电位检测的溶液。仅需染色10分钟就可在荧光显微镜下观察到非常明亮的活细胞线粒体红色荧光染色。
Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针),也称MitoTracker Red CMXRos,是一种具有细胞通透性的X-rosamine衍生物(Chloromethyl-X-rosamine,简称CMXRos),能够特异性地标记细胞中具有生物活性的线粒体,检测线粒体膜电位。本产品为高纯度探针,兼容后续的细胞固定和通透,但染色后再固定和通透,荧光强度会有一定程度的下降。
本产品是一种氧化型的红色荧光染料,只需简单地和细胞孵育,即可通过被动运输穿过细胞膜,并借助本探针含有的弱巯基反应性的氯甲基(Mildly thiol-reactive chloromethyl)官能团特异性地标记有生物活性的线粒体。本探针含有的弱巯基反应性的氯甲基,可以和线粒体内蛋白的巯基反应并共价连接,因此后续实验使用多聚甲醛或甲醛等醛类固定剂,以及细胞通透的去垢剂Triton X-100等处理时,线粒体的荧光标记不会消失,但可能会有一定程度的下降(约下降2-10倍)。由于本荧光探针的激发光谱和发射光谱与常见的绿色荧光探针重叠较少,因此非常适合用于荧光双标实验。
Mito-Tracker Red CMXRos分子式为C32H32Cl2N2O,分子量为531.5,CAS number为167095-09-2,Mito-Tracker Red CMXRos呈红色荧光,最大激发波长为579nm,最大发射波长为599nm。
Mito-Tracker Red CMXRos可以用作线粒体特异性的荧光探针。和Rhodamine 123或JC-1相似,Mito-Tracker Red CMXRos对于线粒体的染色依赖于线粒体膜电位,因此该探针只能对活的细胞或组织进行染色,不能对固定或通透后的细胞或组织进行染色。
本产品适用范围广。本产品可用于各种方法培养出的3D细胞球或类器官,包括超低吸附细胞培养板、Matrix-Gel™基质胶或Matrigel包被的平板、琼脂糖包被的平板、细胞悬滴培养板等。
本产品使用便捷,整个检测过程仅需约10-30分钟即可完成。对于常规的3D细胞活细胞染色,仅需加入本产品避光孵育10分钟即可进行荧光检测。本产品对3D培养的HCT-116细胞的染色效果参考图1。
图1.碧云天Beyo3D™ Mito-Tracker Red CMXRos染色液(1000X) (C1439)对于3D培养的HCT-116细胞的染色效果图。5000个HCT-116细胞使用碧云天3D细胞培养包被试剂盒(U形底96孔板) (C0366)包被的U形底96孔板培养72小时,然后吸除培养液后直接加入Beyo3D™ Mito-Tracker Red CMXRos染色液(1X)染色10分钟(图中两种染料可混合配制后使用)。结果显示,Beyo3D™ Mito-Tracker Red CMXRos对于3D细胞染色效果清晰、明亮,Beyo3D™ Mito-Tracker Red CMXRos染色的线粒体呈现红色荧光(图B),Beyo3D™ Hoechst 33342染色液(C1345)染色的细胞核呈现蓝色荧光(图C),红色荧光及细胞核蓝色荧光的叠加(Merge)效果见图(图D)。实际检测效果会因细胞株、实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中效果仅供参考。
由于Mito-Tracker Red CMXRos在线粒体内的聚集依赖于线粒体的膜电位,因此本产品也可以作为线粒体膜电位的指示探针,通过检测线粒体膜电位的变化来检测细胞凋亡。
传统的细胞培养大多以二维(Two-dimensional, 2D)的形式展开,但2D培养的细胞在生长方式、生长形态、分化和功能等方面都与体内生理条件下细胞的真实形态和结构存在明显差异,可能会因为细胞结构和组织形态的缺失,使实验结果的可信度降低[1-3]。三维(Three-dimensional, 3D)细胞培养能够更好地模拟体内细胞生存的微环境,更能代表体内组织,也能更真实的反映细胞与细胞间、细胞与基质间的相互作用,细胞对外源性和内源性刺激的应答也更接近于它们在体内的反应,3D细胞培养从而成为更有价值并更为可信的体外实验模型,能够获得与体内实验更加一致的实验结果[4-5]。
3D肿瘤细胞模型越来越多地被用于了解疾病机制和药物研发。2D培养的肿瘤细胞,其单侧细胞膜可以均匀地获得营养和氧气,而3D培养的肿瘤细胞团的内部细胞获得营养和氧气的机会更少,形成自然的营养和氧气梯度,能更好地模拟体内微环境条件,因此3D培养的肿瘤球状体(Spheroid)或肿瘤类器官(Organoid)等能更好地模拟体内肿瘤,更利于小分子药物筛选或者肿瘤相关分子机制的研究,也更能准确地预测药物治疗的体内反应、疗效或毒性。同时,2D肿瘤细胞模型体外扩增有一定局限性,在传代后容易丧失原肿瘤的遗传异质性,出现优势克隆选择性,从而降低临床相关性。相比于2D细胞模型,3D细胞球或者类器官很多情况下能提供更可信的研究结果,简化并加速药物评价流程。自2009年小肠类器官首次建立至今,3D细胞和类器官研究已经扩展到很多组织系统,并成为生命科学最热门的领域之一。
按照96孔板每孔需0.1μl Beyo3D™ Mito-Tracker Red CMXRos染色液(1000X),本产品每50μl可以进行500个样品的检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C1439S | Beyo3D™ Mito-Tracker Red CMXRos染色液(1000X) | 50μl |
C1439M | Beyo3D™ Mito-Tracker Red CMXRos染色液(1000X) | 250μl |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC避光保存,一年有效。
注意事项:细胞球在外力的作用下容易变形或分散,PBS洗涤及换液等过程须轻缓,避免破坏或吹散3D细胞球。
Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针)可以用于活细胞的线粒体荧光染色,不适合用于固定后细胞或者组织的染色;但在用本产品标记线粒体后,后续可以进行固定和通透,并用其它探针进行染色或进行免疫荧光染色,但染色后再固定和通透,荧光强度会有一定的下降。而且不同的细胞,固定和通透的影响会有所区别,建议对固定和通透试剂、条件进行一定的测试。
本产品浓度经过碧云天的优化,确保可以满足活细胞染色及各种常规染色的需要。如需使用特定浓度的Mito-Tracker Red CMXRos,请选购碧云天的Mito-Tracker Red CMXRos (线粒体红色荧光探针) (C1049B)。
荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Sample number | 10 samples | 50 samples | 100 samples |
PBS | 1ml | 5ml | 10ml |
Beyo3D™ Mito-Tracker Red CMXRos Staining Solution (1000X) | 1μl | 5μl | 10μl |
Total volume | ~1ml | ~5ml | ~10ml |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0365 | 3D细胞培养板包被液 | 20/100ml |
C0366S | 3D细胞培养包被试剂盒(U形底96孔板) | 5plts |
C0049 | Cell Counting Kit-3D (CCK-3D试剂盒) | 100/500/2500次 |
C0061 | CellTiter-Lumi™发光法3D细胞活力检测试剂盒 | 100/500/2500次 |
C0371 | Matrix-Gel™基质胶(标准型, 含酚红) | 1/5/10/50ml |
C0372 | Matrix-Gel™基质胶(标准型, 不含酚红) | 1/5/10/50ml |
C0376 | Matrix-Gel™基质胶(低生长因子, 不含酚红) | 1/5/10/50ml |
C0383 | Matrix-Gel™基质胶(高浓度, 不含酚红) | 1/5/10/50ml |
C0387 | Matrix-Gel™基质胶(高浓度低生长因子, 不含酚红) | 1/5/10/50ml |
C0392 | Matrix-Gel™基质胶(干细胞用, 不含酚红) | 1/5/10/50ml |
C0396 | Matrix-Gel™基质胶(类器官用, 不含酚红) | 1/5/10/50ml |
C1341 | Beyo3D™ DAPI染色液 | 10/50/200ml |
C1345 | Beyo3D™ Hoechst 33342染色液 | 10/50/200ml |
C1352 | Beyo3D™ PI染色液 | 10/50/200ml |
C1356 | Beyo3D™ YO-PRO-1染色液 | 10/50/200ml |
C1363 | Beyo3D™ YO-PRO-1/PI细胞凋亡与坏死检测试剂盒 | 100/500次 |
C1367 | Beyo3D™ Calcein AM染色液(100X) | 0.1/0.5/2ml |
C1371 | Beyo3D™ Calcein/PI细胞活性与细胞毒性检测试剂盒 | 100/500次 |
C1375 | Beyo3D™ Calcein/PI/Hoechst细胞活力检测试剂盒 | 100/500次 |
C1379 | Beyo3D™ 7-AAD细胞活力检测试剂盒 | 100/500次 |
C1383 | Beyo3D™ Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒 | 20/50/100次 |
C1387 | Beyo3D™ Annexin V-PE细胞凋亡检测试剂盒 | 20/50/100次 |
C1391 | Beyo3D™ Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒 | 20/50次 |
C1395 | Beyo3D™ Annexin V- mCherry细胞凋亡检测试剂盒 | 20/50/100次 |
C1399 | Beyo3D™ Annexin V-mCherry/SYTOX Green细胞凋亡检测试剂盒 | 20/50次 |
C1403 | Beyo3D™活细胞Caspase-3活性与线粒体膜电位检测试剂盒 | 20/50次 |
C1407 | Beyo3D™ Caspase-3活性与Annexin V细胞凋亡检测试剂盒 | 20/50次 |
C1411 | Beyo3D™线粒体膜电位与细胞凋亡检测试剂盒 | 20/50次 |
C1415 | Beyo3D™细胞膜红色荧光染色试剂盒(DiI) | 100/500次 |
C1419 | Beyo3D™细胞膜绿色荧光染色试剂盒(DiO) | 100/500次 |
C1423 | Beyo3D™细胞膜远红荧光染色试剂盒(DiD) | 100/500次 |
C1427S | Beyo3D™ Mito-Tracker Deep Red FM染色液(1000X) | 20μl |
C1431 | Beyo3D™ Mito-Tracker Deep Red 633染色液(1000X) | 50/250μl |
C1435 | Beyo3D™ Mito-Tracker Green染色液(1000X) | 50/250μl |
C1439 | Beyo3D™ Mito-Tracker Red CMXRos染色液(1000X) | 50/250μl |
C1443 | Beyo3D™ Lyso-Tracker Red染色液(1000X) | 50/250μl |
C1447 | Beyo3D™ Lyso-Tracker Green染色液(1000X) | 50/250μl |
C1451S | Beyo3D™ ER-Tracker Red染色试剂盒 | 50次 |
C1455S | Beyo3D™ ER-Tracker Green染色试剂盒 | 50次 |
P0121 | BeyoCUBIC™ 3D细胞透明化试剂盒 | 5/25ml |
FULA061 | BeyoGold™超低吸附6孔板(平底带盖, 独立包装) | 1/5/20个 |
FULA122 | BeyoGold™超低吸附12孔板(平底带盖, 独立包装) | 1/5/20个 |
FULA243 | BeyoGold™超低吸附24孔板(平底带盖, 独立包装) | 1/5/20个 |
FULA485 | BeyoGold™超低吸附48孔板(平底带盖, 独立包装) | 1/5/20个 |
FULA961 | BeyoGold™超低吸附96孔板(平底带盖, 独立包装) | 1/6/24个 |
FULA962 | BeyoGold™超低吸附96孔板(圆底带盖, 独立包装) | 1/6/24个 |
FULA965 | BeyoGold™超低吸附黑色透明底96孔板(平底带盖, 独立包装) | 1/6/24个 |
FULA981 | BeyoGold™超低吸附384孔板(平底带盖, 独立包装) | 1/6/24个 |
FULA985 | BeyoGold™超低吸附黑色透明底384孔板(平底带盖, 独立包装) | 1/6/24个 |
FULA035-10pcs | BeyoGold™超低吸附35mm培养皿 | 10个/袋 |
FULA035-40pcs | BeyoGold™超低吸附35mm培养皿 | 10个/袋, 4袋/箱 |
FULA060-10pcs | BeyoGold™超低吸附60mm培养皿 | 10个/袋 |
FULA060-40pcs | BeyoGold™超低吸附60mm培养皿 | 10个/袋, 4袋/箱 |
FULA100-10pcs | BeyoGold™超低吸附100mm培养皿 | 10个/袋 |
FULA100-40pcs | BeyoGold™超低吸附100mm培养皿 | 10个/袋, 4袋/箱 |