Masson三色染色试剂盒
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产品编号 C0189M
数量
¥ 998.00
产品包装:
1000次 5000次
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碧云天生产的Masson三色染色试剂盒(Masson's Trichrome Staining Kit),也称Masson染色试剂盒(Masson Staining Kit)、结缔组织染色试剂盒(Connective Tissue Stain Kit)、三色染色试剂盒(Trichrome Stain Kit或Trichromic Staining Kit)或Masson-Goldner Staining Kit,是一种通过经典方法简单、高效、灵敏地可染色细胞核并选择性地对胶原纤维(Collagen fiber)和肌纤维(Muscle fiber)进行染色的试剂盒。本试剂盒对不同组织的石蜡切片和冰冻切片均适用。

Masson三色染色又称马松染色,简称Masson染色,是结缔组织(Connective tissue)染色最经典的一种方法,也是区分胶原纤维和肌纤维权威而经典的技术方法,对于组织学研究和疾病的病理诊断有着重要意义。胶原纤维由胶原蛋白经过特殊排列而形成,起着重要的结构支持和强度维护的作用,是许多组织的主要成分之一,特别是在结缔组织中广泛存在。肌纤维包含有肌球蛋白和肌原纤维,负责肌肉的收缩和运动。各种原因引起的组织细胞损伤,可导致组织细胞发生变性、坏死和炎症反应,损伤较小的情况下可完全恢复正常结构和功能,但如果损伤严重,则会发生纤维化(Fibrosis),即纤维大量增生填补组织缺损,却无法恢复正常的结构和功能[1]。通过Masson染色可以分析组织中胶原纤维的数量和分布,评估组织的纤维化程度;帮助鉴别组织中的炎症细胞和炎症相关的纤维化变化[2];显示肿瘤周围或内部的纤维组织反应和结构,辅助判断和诊断肿瘤类型和分级[3]。

本试剂盒的染色原理如下。Masson染色通过使用苏木素、亮绿以及丽春红-酸性品红三种阴离子染料,选择性地对细胞核、胶原纤维和肌纤维进行染色。染色时根据组织不同的渗透性,不同组织可被分子大小不同的阴离子染料着染,显示不同的颜色。而组织的渗透性取决于组织的结构密度。不同的组织和细胞成分具有不同的孔隙大小,如孔隙小,组织结构致密,渗透性低;孔隙宽,组织结构疏松,渗透性高。小分子量的染料易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量的染料则只能进入结构疏松、渗透性高的组织。例如已固定的组织经Masson染色,红细胞、细胞核等被最小分子的阴离子染料苏木素着染,显紫色;肌纤维、胞浆等被中等大小的阴离子染料丽春红-酸性品红染色,显红色;而胶原纤维等则被大分子的阴离子染料亮绿着染,显绿色[4]。

本试剂盒组分齐全,提供了Masson染色所需的苏木素染色液、酸性分化液、丽春红-酸性品红染色液、亮绿染色液及磷钨钼酸分化液,用户只需自备各梯度浓度的乙醇溶液即可完成整个实验过程。

本试剂盒操作简捷,性能稳定,分化时间短,显色清晰,所染切片保存时间长且不易褪色,用于大鼠胃部石蜡切片的染色效果参考图1。

图1.碧云天Masson三色染色试剂盒(C0189)用于大鼠胃部石蜡切片的染色效果图。图中可见基底膜胶原纤维被亮绿染成绿色,胞浆被丽春红-酸性品红染成红色,细胞核被苏木素染成紫黑色。实际染色效果会因样品、检测条件的不同而略有差异,本图仅供参考。

按照使用说明推荐用量,即每张切片使用50μl染色液体系计算,本试剂盒小包装和中包装可分别进行1000次和5000次染色;如果每个切片使用100μl的染色液,则小包装和中包装可分别进行500次和2500次染色。其它用量的情况,相应包装试剂盒的使用次数相应变动。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
C0189S-1 苏木素染色液 50ml
C0189S-2 酸性分化液 100ml
C0189S-3 丽春红-酸性品红染色液 50ml
C0189S-4 磷钼酸分化液 50ml
C0189S-5 亮绿染色液 50ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
C0189M-1 苏木素染色液 250ml
C0189M-2 酸性分化液 500ml
C0189M-3 丽春红-酸性品红染色液 250ml
C0189M-4 磷钼酸分化液 250ml
C0189M-5 亮绿染色液 250ml
说明书 1份
保存条件:

室温保存,一年有效。

注意事项:

请勿-20ºC冻存,否则可能会有沉淀析出,影响使用效果。

丽春红-酸性品红染色液遇水易脱色,染色后用蒸馏水润洗不能超过10秒。

磷钼酸分化液与酸性分化液的使用次序不能颠倒。磷钼酸分化液一方面可以使被丽春红-酸性品红染色液染上红色的胶原纤维分化成无色或淡红色,而肌纤维等仍呈鲜红色;另一方面对胶原纤维又起媒染作用,使胶原纤维与大分子染料亮绿更易结合。磷钼酸分化液分化后无需水洗。

亮绿染色液染色后使用酸性溶液分化的目的是除去原浆中的绿色,使染色鲜艳清晰,推荐分化时间为1分钟,可根据染色效果自行调整。

酸性分化液为易燃液体,须密闭储存于阴凉、干燥、通风良好的地方,建议存放在易燃液体的专用安全柜中,并远离明火、火花、热源、热表面,禁止吸烟。

酸性分化液有腐蚀性,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或腐蚀其他物品。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.样品处理。
a.对于石蜡切片:
(a)石蜡切片的制备:按照常规方法进行取材、固定、洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、烘片等步骤制备石蜡切片。
(b)二甲苯中脱蜡5-10分钟。
(c)换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟。
(d)依次浸入无水乙醇5分钟,90%乙醇2分钟,80%乙醇2分钟, 70%乙醇2分钟。
(e)蒸馏水洗涤2分钟。
b.对于冰冻切片:
(a)冰冻切片的制备:按照常规方法进行取材、速冻、切片、烘片等步骤制备冰冻切片。
(b)蒸馏水洗涤2分钟。
(c)浸入70%乙醇2分钟。
2.Masson染色。
a.苏木素染色:
每个组织切片滴加50μl苏木素染色液,染色5分钟,去除染色液,蒸馏水洗涤5分钟。适量酸性分化液分化30秒,自来水流水冲洗返蓝10分钟,蒸馏水洗涤一遍(数秒钟)。
注:根据切片的实际大小情况,可滴加50-200μl的染色液,本使用说明以50μl为例。
b.丽春红-酸性品红染色:
每个组织切片滴加50μl丽春红-酸性品红染色液,染色10分钟,去除染色液,用蒸馏水润洗数秒(不能超过10秒)。适量磷钼酸分化液分化2分钟,去除分化液。
c.亮绿染色:
每个组织切片滴加50μl亮绿染色液,染色1分钟,去除染色液,用蒸馏水润洗数秒。适量酸性分化液分化1分钟,去除分化液。
d.脱水:
将组织切片快速依次放入70%乙醇,80%乙醇,90%乙醇和无水乙醇脱水各10秒,二甲苯透明3遍,每次1-2分钟。
e.封片:
此时可以直接显微镜下观察,或使用中性树胶或其它封片剂封片,尽量避免气泡,随后即可在显微镜下观察组织切片。
参考文献:
1.Darby IA, Hewitson TD. Int Rev Cytol. 2007. 257:143-79.
2.Dong L, Wang Y, Zheng T, Pu Y, Ma Y, et al. Stem Cell Res Ther. 2021. 12(1):4.
3.Marks E, Ewart M. Arch Pathol Lab Med. 2016. 140(10):1153-6.
4.Gentile G, Tambuzzi S, Boracchi M, Andreola S, Zoja R. Leg Med (Tokyo). 2021. 52:101905.
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