来源 | 用途 | 可检测样品 | 抗体类型 | p53分子量 |
Mouse | WB, IP, IC, IF | H, M, R, Mk | IgG2a | 53kD |
WB,Western blot;IP,Immunoprecipitation;IC,Immunocytochemistry;IF,Immunofluorescence.
H, human; M, mouse; Mk, monkey.
本p53抗体(p53 antibody)为进口分装,用经过适当修饰的人重组p53为抗原制备而成的抗p53小鼠单克隆抗体。克隆号为BP53-12。
本p53抗体可以识别人、小鼠、大鼠和猴子的p53,其他种属未经测试。本抗体可以检测一些高表达p53的肿瘤细胞内源性的总p53蛋白水平。本抗体较难检测到正常成纤维细胞中的p53。本抗体识别的是p53近N端部分,可以识别p53/T complex。
p53是一种肿瘤抑制蛋白,在细胞对DNA损伤或基因组异常响应过程中起关键作用。p53激活可以导致细胞周期阻滞(cell cyc
le arrest),DNA修复或细胞凋亡。MDM2是p53的E3 ligase,可以导致p53的泛素化修饰并被蛋白酶体降解。p53可以被多种蛋白激酶在多个位点磷酸化修饰。DNA损伤诱导的p53 Ser15和Ser20磷酸化可以减弱p53和其负调控因子MDM2的结合。p53可以被ATM,ATR和DNA-PK等在Ser15和Ser37位磷酸化,从而抑制p53的泛素化降解,促进p53的激活和积累。Chk1和Chk2可以磷酸化p53的Ser20,促进p53的四聚化,增强其稳定性和活性。p53的Ser46磷酸化和其诱导细胞凋亡密切相关。p53的Ser392可以被CAK磷酸化,该位点磷酸化和p53的抑制生长功能及其DNA结合和转录激活有关。p53可以被p300和CBP乙酰化修饰,可以被Sirt1去乙酰化修饰。p53的乙酰化修饰可以促进其在应激反应中的累积和激活。
配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):
WB | IP | IC | IF |
1:1000 | 1:200 | 1:500 | 1:500 |
本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
AP062-1 | p53抗体(小鼠单抗) | 20μl |
AP062-2 | Western一抗稀释液 | 20ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
p53抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
本抗体检测的目的蛋白的分子量比较大,需注意选择浓度较低的胶,并需注意大分子量蛋白转膜通常比较困难。
在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。