IRE1α抗体(兔多抗)
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产品编号 AI601
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¥ 945.00
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使用说明
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来源 用途 交叉反应性 IRE1α分子量
Rabbit WB, IP H ~110kD

      WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation.
      H, human.
      本IRE1α抗体(IRE1α antibody,Inositol-requiring enzyme-1α antibody)为进口分装,用人工合成的人IRE1α的一段多肽(aa953-aa969)进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。
      本IRE1α抗体识别的是总IRE1α(total IRE1α),可以检测内源性的IRE1α,未发现和其它激酶有交叉反应。
      IRE1(inosital-requiring enzyme-1),也称ERN1(endoplasmic reticulum to nucleus signaling 1),是一种定位于内质网的跨膜蛋白,同时具有蛋白激酶和核糖核酸酶(ribonuclease)活性。哺乳动物中有两种IRE1,分别为IER1α和IRE1。IRE1α在不同组织中广泛表达,IRE1β主要分布在消化道上皮细胞。IRE1在内质网应激(ER stress)诱导的未折叠蛋白响应(unfolded protein response,UPR)中起重要作用。IRE1包含一个内质网腔隙氨基末端结构域,一个跨膜区,一个羧基末端胞浆结构域。胞浆区由一个Ser/Thr蛋白激酶区结构域和一个位点特异的核糖核酸内切酶(RNase)结构域组成。IRE1可以通过其氨基末端结构域感知内质网内蛋白的折叠状态。在非折叠蛋白或错误折叠蛋白存在时,会导致IRE1的二聚化和自身磷酸化,同时激活IRE1。IRE1激活后,其核糖核酸内切酶结构域会剪接XBP1(X-box binding protein)mRNA,使其成为未折叠蛋白响应(unfolded protein response,UPR)中的强转录激活因子,促进内质网分子伴侣和UPR靶蛋白等UPR效应基因的转录。在UPR过程中,IRE1还可以通过XBP-1非依赖途径调节一些定位在内质网中的mRNA的降解。如果未折叠蛋白或错误折叠蛋白的情况未能被UPR有效缓解,IRE1的持续激活会导致JNK信号通路的激活,最后导致细胞凋亡。
      配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
      建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB IP
1:500 1:25

      本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
AI601-1 IRE1α抗体(兔多抗) 40μl
AI601-2 Western一抗稀释液 20ml
说明书 1份

保存条件:
      IRE1α抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
      在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
      回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. Western检测:
A. 按照1:500用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动2小时,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C. 回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/western.htm
2. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
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