FoxO3a抗体(兔单抗)
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产品编号 AF609
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¥ 1068.00
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来源 用途 交叉反应性 抗体类型 FoxO3a分子量
Rabbit WB, IF H, M, R IgG 82~97kD

      WB, Western blot; IF, Immunofluorescence.
      H, human; M, mouse; R, rat.
      本FoxO3a抗体(FoxO3a antibody)为进口分装,用人FoxO3a Glu50附近一段多肽作为抗原制备而成的抗FoxO3a兔单克隆抗体。克隆号为75D8。
      本FoxO3a抗体识别的是总FoxO3a(total FoxO3a),可以检测内源性的FoxO3a蛋白水平,未发现和外源表达的FoxO4或FoxO1有交叉反应。
      转录因子Forkhead家族蛋白与横纹肌肉瘤、急性白血病等肿瘤发生有关。该转录因子蛋白家族中的FoxO1,FoxO4和
FoxO3a,和线虫同源蛋白DAF-16的序列高度相似,介导了包括IGFR1,PI3K和Akt在内的信号转导通路。Forkhead家族蛋白激活后,可通过促进细胞周期阻滞(cell cycle arrest)和细胞凋亡而抑制肿瘤。高表达Forkhead家族蛋白会导致细胞周期抑制蛋白p27Kip1的激活。同时Forkhead家族蛋白在TGF-β介导的p21CIP1上调中起作用,而该过程又可被PI3K所负调控。胰岛素等诱导的增殖信号会导致FoxO蛋白通过Akt介导的Thr24、Ser256和Ser319位点的磷酸化,导致FoxO从细胞核中转运到细胞浆中,从而抑制其转录活性。FoxO还可以被Sirt1、p300等进行乙酰化调控。
      FoxO3a,也称FoxO3或FKHR-L1,属于Forkhead蛋白家族中的O亚家族(O subclass),是一种可以被Akt磷酸化后转运到细胞浆中而失活的转录因子。FoxO3a可识别和结合DNA序列5'-[AG]TAAA[TC]A-3'。FoxO3a可以通过上调促凋亡基因Bim和PUMA或下调抗凋亡基因FLIP等,触发细胞凋亡。FoxO3a也可以上调抗氧化酶如过氧化氢酶和MnSOD,从而抵抗氧化应激反应。FoxO3a被认为是抑瘤基因,和多种肿瘤有关。FoxO3a基因型与人类长寿密切相关。
      配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
      建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB IF
1:1000 1:200

      本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
AF609-1 FoxO3a抗体(兔单抗) 20μl
AF609-2 Western一抗稀释液 20ml
说明书 1份

保存条件:
      FoxO3a抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
      对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
      在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
      回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. Western检测:
A. 按照1:1000用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C. 回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/western.htm
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
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使用本产品的文献:
1. Cui J, Liu X, Zhang Z, Xuan Y, Liu X, Zhang F
Life Sci 2018 Dec 28. pii: S0024-3205(18)30838-5. (IF 3.647)