CENP-A抗体(兔多抗)
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产品编号 AC301
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¥ 868.00
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来源 用途 交叉反应性 抗体识别位点 CENP-A分子量
Rabbit WB, IF H CENP-A N-terminal ~17kD

WB, Western blot; IF, Immunofluorescence.
H, human.
本CENP-A抗体(CENP-A antibody)为进口分装,用人工合成的人CENP-A氨基端(N-terminal)的一段多肽(4-17位氨基酸)进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。
本CENP-A抗体识别总CENP-A(total CENP-A),可检测内源性的CENP-A,未发现和其它histone蛋白有交叉反应。
染色质结构调控在真核细胞转录和复制的调节中起着重要作用。核小体是染色质的主要构架,由四种核心组蛋白(histones)组成,包括H2A、H2B、H3和H4。除了众多的翻译后组蛋白修饰包括磷酸化、乙酰化和甲基化等机制,细胞中组蛋白和类组蛋白(variant histone or histone like protein)的互换,也可以直接或间接地影响染色质结构。着丝粒蛋白CENP(centromere proteins)包括CENP-A、CENP-B和CENP-C,是着丝点(kinetochore)的组成蛋白。CENP-A,也称CSE4(capping-enzyme suppressor 4-p),是重要的类组蛋白,和histone H3的氨基端有62%的同源性,它可以取代着丝粒异染色质上的histone H3,和DNA直接结合。CENP-A和histone H3的氨基端47个氨基酸残基没有相似性,CENP-A的氨基末端可以结合核小体之间的linker DNA,协助着丝粒异染色质的正确组装和折叠。CENP-A的多种功能受磷酸化调节。CENP-A的Ser7在有丝分裂早期的初始阶段(early prophase),在histone H3被磷酸化后,可以被Aurora-A和Aurora-B蛋白激酶所磷酸化。CENP-A的磷酸化对于着丝点(kinetochore)正确结合到微管和有丝分裂中染色体的正确排列都是必需的。CENP-A在有丝分裂后期的初始阶段(early anaphase),在histone H3去磷酸化之前,会被去磷酸化。CENP-A和histone H3磷酸化的时间差异,提示两者尽管有非常相似的磷酸化位点,但它们的生物学功能是有所不同的。CENP-A敲除小鼠会出现严重的有丝分裂缺陷,导致胚胎致死,通常不超过胚胎发育的第6.5天。
配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB IF
1:500 1:100

本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
AC301-1 CENP-A抗体(兔多抗) 40μl
AC301-2 Western一抗稀释液 20ml
说明书 1份

保存条件:
CENP-A抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. Western检测:
A. 按照1:500用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动2小时,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C. 回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:http://www.beyotime.com/support/western.htm
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
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使用本产品的文献:
1. 张 驰, 李 蕊, 李康生
癌变·畸变·突变 2011;23(3).