来源 | 用途 | 交叉反应性 | β-Catenin分子量 |
Rabbit | WB, IP, IHC-P, ChIP | H, M, R, Mk | ~92kD |
WB,Western blot;IP,Immunoprecipitation;IHC-P,Immunohistochemistry-Paraffin;ChIP,Chromatin Immunoprecipitation.
H, human; M, mouse; R, rat; Mk, monkey.
本β-Catenin抗体(β-Catenin antibody)为进口分装,用人工合成的人β-catenin Ser37附近一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。
本β-Catenin抗体识别的是总β-catenin(total β-catenin),可以检测内源性的β-catenin,未发现和α-catenin和γ-catenin有交叉反应。
β-catenin是Wnt信号通路下游的重要的效应蛋白,在早期胚胎发育过程和肿瘤发生过程中起重要作用。肌酸激酶1(CK1)可磷酸化β-catenin Ser45。在Ser45被磷酸化后,β-catenin可以被糖原合成酶激酶3(GSK-3)所磷酸化。GSK-3β通过磷酸化β-catenin Ser33,Ser37 和Thr41,从而促进β-catenin的泛素化降解。研究发现,在多种肿瘤中β-catenin的这些磷酸化位点会发生突变,β-catenin蛋白稳定性水平大大提高。Wnt信号通路激活,会导致β-catenin的磷酸化水平下降,导致其蛋白稳定性增加和蛋白水平的升高,β-catenin会转移到细胞核内和TCF相互作用,促进下游相关基因表达。
配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):
WB | IP | IHC-P | ChIP |
1:1000 | 1:200 | 1:200 | 1:25 |
本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
AC106-1 | β-Catenin抗体(兔多抗) | 20μl |
AC106-2 | Western一抗稀释液 | 20ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
β-Catenin抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. Western检测:
A. 按照1:1000用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C. 回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:http://www.beyotime.com/support/western.htm
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。