来源 | 用途 | 交叉反应性 | 抗体识别位点 | Caspase-3分子量 |
Rabbit | WB, IP, IHC | H, M, R, Mk | Caspase-3 | ~35/17kD |
WB,Western blot; IP,immuneprecipitation; IHC,immunohistochemistry.
H,human;M,mouse;R,rat;Mk,monkey.
本Caspase-3抗体(Caspase-3 antibody)为进口分装,用人工合成的人Caspase-3本身的切割位点处一段多肽,经适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度多克隆抗体。
本Caspase-3抗体可以识别全长的Caspase-3(35kD),也可以识别Caspase-3被剪切后产生的17kD片段。未发现和其它Caspase家族蛋白有交叉反应。
Caspase-3是细胞凋亡过程中最关键的执行分子(key executioner)之一,可以剪切细胞凋亡过程中的许多关键蛋白,例如PARP。Caspase-3的激活需要从没有活性的全长Caspase-3(35kD),在Asp28和Ser29之间及Asp175和Ser176之间进行剪切,产生有活性的17kD肽段。
Caspase-3的激活常被作为细胞凋亡的一个重要指标。
配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
建议本抗体使用时的起始稀释比例参考下表(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整)。Western检测全长Caspase-3参考下表按照1:1000稀释,检测Caspase-3被剪切后产生的17kD肽段须根据Caspase-3的激活情况酌情稀释。
WB | IP | IHC |
1:1000 | 1:50 | 1:500 |
本抗体如果用于常规的Western检测至少可以检测20次。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
AC030-1 | Caspase-3抗体(兔多抗) | 20μl |
AC030-2 | Western一抗稀释液 | 20ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
Caspase-3抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1.Western检测:
A.按照1:1000用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B.把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C.回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D.按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:http://www.beyotime.com/support/western.htm
2.其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。