BeyoAb™ LC3B Rabbit Polyclonal Antibody
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产品编号 AB2023-50μl
数量
¥ 498.00
产品包装:
50μl 200μl
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来源 用途 交叉反应性 理论分子量 实际分子量
Rabbit WB, IF, IHC, ICC H, M, Rb 15KDa 14/16KDa

WB, Western blot; IF, Immunofluorescence; IHC, Immunohistochemistry; ICC, Immunocytochemistry. H, Human; M, Mouse; Rb, Rabbit.

BeyoAb™系列抗体为经深入测试的优质抗体,并配套提供Western一抗稀释液,可用于Western或其它适当用途的一抗稀释。

建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整,NT, not tested)。

WB IP IF IHC ICC FC ChIP
1:1000-1:2000 NT 1:50-1:200 1:50 1:50-1:200 NT NT

本抗体相关应用的代表性检测效果图片请参见Fig. 1。

Fig. 1. BeyoAb™ LC3B Rabbit Polyclonal Antibody (AB2023) was used for Western blot, immunofluorescence and immunohistochemistry.

A. Western analysis of lysates from indicated cell lines treated with 50μM chloroquine for 20h using BeyoAb™ LC3B Rabbit Polyclonal Antibody (AB2023) at 1:2000 dilution and BeyoWB™ HRP-labeled Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (P0948) at 1:500 dilution. 20µg protein per lane was loaded and analyzed by BeyoWB™ 80min Electrophoresis, Transfer and Western Blot Kit (P0002). Exposure time, 2s.

B. Immunofluorescence analysis of HeLa cells treated with 50μM chloroquine for 20h using BeyoAb™ LC3B Rabbit Polyclonal Antibody (AB2023) at a dilution of 1:100 and Cy3-labeled Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (A0516) at 1:250 dilution. a. Brightfield. b. Immunofluorescence image for LC3B. c. Nuclear staining using Antifade Mounting Medium with DAPI (P0131). d, Merged image for b and c.

C. Immunohistochemistry of a section from paraffin-embedded mouse brain tissue using BeyoAb™ LC3B Rabbit Polyclonal Antibody (AB2023) at a dilution of 1:50 (bottom panel) compared to a negative control without primary antibody (Top panel). HRP-labeled Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) (A0208) was used as secondary antibody at 1:1000 dilution.

抗体详细信息如下:

About this Antibody
Name BeyoAb™ LC3B Rabbit Polyclonal Antibody
Category Polyclonal antibody (pAb); Primary antibody
Isotype IgG
Purification method Protein A affinity purification
Positive samples HeLa; NIH/3T3
Cellular location -
Customer validation -
About the Immunogen
Immunogen Recombinant protein
Sequence -
Gene ID 81631
SwissProt Q9GZQ8
Synonyms MAP1LC3B; ATG8F; LC3B; MAP1A/1BLC3; MAP1LC3B-a; microtubule associated protein 1 light chain 3 beta
Category Organelle Markers; Autophagy Signaling
Background Autophagy is a catabolic process for the autophagosomic-lysosomal degradation of bulk cytoplasmic contents [1]. Autophagy is generally activated by conditions of nutrient deprivation, but it has also been associated with a number of physiological processes including development, differentiation, neurodegenerative diseases, infection, and cancer. Autophagy marker Light Chain 3 (LC3) was originally identified as a subunit of microtubule-associated proteins 1A and 1B (termed MAP1LC3) and subsequently found to contain similarity to the yeast protein Apg8/Aut7/Cvt5 critical for autophagy. Three human LC3 isoforms (LC3A, LC3B, and LC3C) undergo post-translational modifications during autophagy [2]. Cleavage of LC3 at the carboxy terminus immediately following synthesis yields the cytosolic LC3-I form. During autophagy, LC3-I is converted to LC3-II through lipidation by a ubiquitin-like system involving Atg7 and Atg3 that allows for LC3 to become associated with autophagic vesicles. The presence of LC3 in autophagosomes and the conversion of LC3 to the lower migrating form, LC3-II, have been used as indicators of autophagy [3].
包装清单:
产品编号 产品名称 包装
AB2023-50μl BeyoAb™ LC3B Rabbit Polyclonal Antibody 50μl
AZ050 Western一抗稀释液 50ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
AB2023-200μl BeyoAb™ LC3B Rabbit Polyclonal Antibody 200μl
AZ200 Western一抗稀释液 200ml
说明书 1份
保存条件:

-20ºC保存,至少一年有效。Western一抗稀释液也可以4ºC保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4ºC保存,长期不使用可以考虑-20ºC保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。

注意事项:

如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验,请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,请4ºC保存。

回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10,000×g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。

提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果,请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
请根据抗体的实际用途选择相应的使用方法。
1. Western检测:

a. 按照推荐的稀释比例使用本产品提供的Western一抗稀释液稀释抗体或使用特定的Western检测试剂盒中的抗体稀释液稀释抗体。推荐使用碧云天生产的BeyoWB™ 30分钟Western检测试剂盒(P0001)、BeyoWB™ 30分钟Western检测试剂盒(小鼠一抗用) (P0956)、BeyoWB™ 30分钟Western检测试剂盒(兔一抗用) (P0958)或BeyoWB™ 80分钟电泳转膜与Western检测试剂盒(P0002)中的BeyoWB™抗体稀释液稀释抗体。
b. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4ºC缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动1-2小时,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。如果使用碧云天的上述Wesetrn检测试剂盒中的BeyoWB™抗体稀释液稀释抗体,仅须室温孵育15分钟。
c. 回收稀释的一抗,4ºC保存以备下次继续使用。
d. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/western.htm
如果使用碧云天的上述Wesetrn检测试剂盒,请按照试剂盒的说明书进行后续实验操作。
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
参考文献:
1. Oh J, Tamborindeguy C. Insects. 2023. 14(2):142.
2. Baeken MW, Weckmann K, Diefenthäler P, Schulte J, Yusifli K, et al. Cells. 2020. 9(10):2315.
3. Anida I, Ueno T, Kominami E. Methods Mol Biol. 2008. 445:77-88.
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P0002 BeyoWB™ 80分钟电泳转膜与Western检测试剂盒 6-15次/30-75次
P0956 BeyoWB™ 30分钟Western检测试剂盒(小鼠一抗用) 6-15次/30-75次
P0958 BeyoWB™ 30分钟Western检测试剂盒(兔一抗用) 6-15次/30-75次
P0946 BeyoWB™ HRP标记山羊抗小鼠IgG(H+L) 200μl/1ml
P0948 BeyoWB™ HRP标记山羊抗兔IgG(H+L) 200μl/1ml
P0950 BeyoWB™封闭液 100ml/500ml
P0951 BeyoWB™抗体稀释液 100ml/500ml
P0952-500ml BeyoWB™洗涤液 500ml
P0953-100ml BeyoWB™洗涤液(10X) 100ml
P0955 BeyoWB™ BeyoECL 100ml/500ml
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E6050 MiniBlot™蛋白转膜系统 1套
E6150 MiniProGel™蛋白制胶、电泳与转膜系统(2胶/2膜) 1套
E6155 MiniProGel™蛋白制胶、电泳与转膜系统(4胶/2膜) 1套
E6080 BeyoPower™中电流电源(300V/600mA/100W) 1套
E6085 BeyoPower™高电流电源(300V/2000mA/200W) 1套
FFP24 PVDF膜(进口分装, 6.6×8.5cm, 0.2μm) 20张/包装
FFP32 PVDF膜(进口分装, 6.6×8.5cm, 0.45μm) 20张/包装
FFP51 转印滤纸(7.5×10cm) 100张/包装
FFX050-FFX055 Western洗膜盒 1个/包装
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P0018A BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒) 100ml/500ml
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P0021A Western转膜液 1L
P0021S PVDF膜浸润活化液 250ml/500ml×2
P0022 丽春红染色液 120ml/500ml
P0023A Western一抗稀释液 100ml/500ml
P0023B Western封闭液 100ml/500ml
P0023C Western洗涤液 250ml/500ml×2
P0023D Western二抗稀释液 100ml/500ml
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