来源 | 用途 | 交叉反应性 | 抗体类型 | Aurora分子量 |
Rabbit | WB, IF, F | H, M, R | IgG | ~35,40,48kDa |
WB, Western blot; IF, Immunofluorescence; F, Flow cytometry.
H, human; M, mouse; R, rat;.
本Phospho-Aurora抗体(Phospho-Aurora antibody)为进口分装,用经过适当修饰的人工合成的Thr232附近的一段人Aurora B多肽作为抗原制备成的抗Phospho-Aurora A(Thr288)/Aurora B(Thr232)/Aurora C(Thr198)兔单克隆抗体。克隆号为D13A11。
本 Phospho-Aurora 抗体可以同时识别Thr288, Thr232和Thr198位点分别磷酸化的Aurora A、Aurora B和Aurora C,即Western检测时可以最多可以检测到Phospho-Aurora A、Phospho-Aurora B和Phospho-Aurora C三条条带,分子量分别约为35、40和48kD。未发现和其它激酶有交叉反应。
Aurora激酶属于一个高度保守的丝氨酸/苏氨酸激酶家族,在哺乳动物中目前发现有Aurora A、Aurora B和Aurora C三个成员。Aurora A是一种受细胞周期调控的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在多种肿瘤细胞系中高表达。位于激酶活性域上的Thr288磷酸化,可导致该激酶活性显著增加,同时也会导致Aurora A在有丝分裂过程中的泛素化降解。Aurora A可以调节有丝分裂过程中的染色质分离(chromatin segregation)和胞质分裂(cytokinesis)。在细胞周期从S期向M期进行转化时,Aurora A定位在中心体(centrosome)上,参与中心体的分离和成熟(centrosome separation and maturation)以及纺锤体的形成和稳定。Aurora A在G1和S期的表达水平较低,在G2/M期有较高的表达水平。Aurora B和Aurora C同样在G2/M期的表达水平比较高。Aurora A的激酶活性表现为可以磷酸化BRCA1,调节细胞周期G2期到M期的转化。在很多乳腺、卵巢、胃和结肠等的肿瘤组织中Aurora A表达异常或活性异常,提示其与肿瘤的发生或发展密切相关。Aurora B和Aurora C也被发现在多种肿瘤中高表达。
配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):
WB | IF | F |
1:1000 | 1:50 | 1:50 |
本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
AA923-1 | Phospho-Aurora抗体(兔单抗) | 20μl |
AA923-2 | Western一抗稀释液 | 20ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
Phospho-Aurora抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. Western检测:
A. 按照1:1000用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C. 回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:http://www.beyotime.com/support/western.htm
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。