本辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-labeled Streptavidin),也称HRP-Streptavidin、Streptavidin-HRP或辣根过氧化物酶标记链霉亲和素,可以用于生物素(Biotin)标记的抗体、核酸、蛋白或其它生物素标记分子的检测。具体用途包括Western、ELISA、免疫组化或免疫细胞化学、原位杂交、Southern、Northern、EMSA等。
Streptavidin的分子量为52kD,可以高度特异性地和生物素(Biotin)结合。Streptavidin和生物素的亲和常数为Kd=10-15M。Streptavidin是一个4聚体蛋白,可以同时结合4个生物素分子。Streptavidin的中文名为链霉亲和素,从Streptomyces adidinii中纯化获得,和鸡蛋清来源的Avidin(亲和素)在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性。和Avidin不同的是,Streptavidin是一种非糖基化蛋白,并且基本不带电荷。Avidin的pI= ~10.5,在中性pH条件下呈碱性。由于Streptavidin和Avidin相比在中性条件下不带电荷,因此Streptavidin的非特异性结合比Avidin低很多,这样检测时的非特异性背景就低很多。因此目前在生物素检测时通常使用Streptavidin替代Avidin [1]。
辣根过氧化物酶即horseradish peroxidase (HRP),可以在Western、EMSA、Southern或Northern等检测时催化ECL类试剂(如ECL、BeyoECL等)产生化学发光,可以在ELISA时催化TMB产生蓝色,也可以在免疫组化、免疫细胞化学或Western blot检测时催化DAB产生棕色沉淀[2]。
本HRP-Streptavidin用高纯度的Streptavidin和超纯的辣根过氧化物酶交联而成,确保产生最低的本底和最高的灵敏度。不同浓度生物素标记二抗使用本产品进行显色检测效果参见图1。
图1. 碧云天辣根过氧化物酶标记Streptavidin (A0305)的检测效果图。使用兔抗山羊抗体对96孔板进行包被和封闭后,将生物素标记山羊抗小鼠IgG(H+L) (A0286)稀释至图中所示各浓度,加入各反应孔中室温孵育1小时;洗板后,分别加入100ng/ml的辣根过氧化物酶标记Streptavidin本产品(A0305)和国外T公司(Competitor)的同类产品,室温孵育25分钟;洗板后,加入100µl TMB显色液(ELISA HRP显色用) (P0209),室温避光孵育5分钟后加入TMB显色终止液(450nm, 不含硫酸) (P0215)并在450nm检测吸光度。图A为使用本产品和国外T公司同类产品进行检测的标准曲线,生物素标记二抗浓度为横坐标,A450为纵坐标。图B为检测低浓度的生物素标记二抗的吸光度。图中可见,在比较适宜的生物素标记样品浓度范围内,本产品的检测信号比国外T公司同类产品高约1倍。实测数据会因试剂、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
本辣根过氧化物酶标记Streptavidin的浓度为1mg/ml。本产品用于各种常规用途的推荐稀释比例参考下表,实际实验操作过程中需根据具体情况适当调节辣根过氧化物酶标记Streptavidin的稀释比例。对于Western,推荐的稀释范围为1:2000-10,000。
WB | IHC/IC/ISH | ELISA | Southern/Northern | EMSA |
1:2000-10,000 | 1:200-500 | 1:2000-10,000 | 1:2000-5000 | 1:2000-5000 |
WB, Western blot; IHC, Immunohistochemistry; IC, Immunocytochemistry; ISH, in situ hybridization.
如果用于常规的Western检测,以每次检测需10毫升1:2000稀释的本产品计,本产品0.2ml包装可以检测40次,1ml包装可以检测200次,5ml包装可以检测1000次。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
A0305-0.2ml | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 0.2ml |
A0305-1ml | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 1ml |
A0305-5ml | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 5ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,一年有效。
注意事项:叠氮钠会抑制辣根过氧化物酶的活性,在含有辣根过氧化物酶的溶液中不可加入叠氮钠。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
A0181 | 辣根过氧化物酶标记驴抗山羊IgG(H+L) | 0.2ml |
A0192 | 辣根过氧化物酶标记山羊抗大鼠IgG(H+L) | 0.5ml |
A0201 | 辣根过氧化物酶标记山羊抗人IgG(H+L) | 1ml |
A0208 | 辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H+L) | 1ml |
A0216 | 辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L) | 1ml |
A0279 | 生物素高效标记山羊抗兔IgG(H+L) | 0.5ml |
A0288 | 生物素高效标记山羊抗小鼠IgG(H+L) | 0.5ml |
A0303 | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 0.2ml |
A0305-0.2ml | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 0.2ml |
A0305-1ml | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 1ml |
A0305-5ml | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 5ml |
P0018S | BeyoECL Plus (超敏ECL化学发光试剂盒) | 100ml |
P0018M | BeyoECL Plus (超敏ECL化学发光试剂盒) | 500ml |
P0018AS | BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒) | 100ml |
P0018AM | BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒) | 500ml |
P0018FS | BeyoECL Moon (极超敏ECL化学发光试剂盒) | 100ml |
P0018FM | BeyoECL Moon (极超敏ECL化学发光试剂盒) | 500ml |
P0209-100ml | TMB显色液(ELISA HRP显色用) | 100ml |
P0209-500ml | TMB显色液(ELISA HRP显色用) | 500ml |
P0210-100ml | 增强型TMB显色液(ELISA HRP显色用) | 100ml |
P0210-500ml | 增强型TMB显色液(ELISA HRP显色用) | 500ml |