问:凝胶保存在甘油中,首先需要怎么洗涤除去甘油 小云 2023-09-18 15:56:05
碧云爱答说: 2023-09-19 16:01:56
2.Anti-Flag Affinity Gel (Anti-Flag亲和凝胶)的准备。 由于Anti-Flag Affinity Gel储存在含50%甘油的保护液中,所以需要在加入样品前适当洗涤。 a.轻轻重悬Anti-Flag Affinity Gel,尽量形成均匀的凝胶悬液,按照通常每100μl细胞裂解液中加入20μl混合均匀的凝胶悬液(以下免疫沉淀法中都以20μl凝胶悬液为例),取适量Anti-Flag Affinity Gel至一洁净离心管中(FTUB015),加入1X TBS (ST661/ST665)至最终体积为约0.5ml。注:使用大孔径吸头(如用剪刀剪去部分吸头)吸取凝胶悬液会比较方便。 b.轻轻重悬Anti-Flag Affinity Gel,6000×g在4℃离心30秒,小心去除上清,不要吸到凝胶。重复上述步骤两次。
问:请问P2282是DNase RNase free的么? 小云 2023-06-19 12:06:15
碧云爱答说: 2023-06-20 13:13:03
不是。
问:没注意保存条件,直接放-20了,还能用吗 小云 2023-04-27 12:23:43
碧云爱答说: 2023-04-27 15:23:30
仅冻存过一次,可以做预实验看看效果
问:请问这个凝胶上的Flag抗体是抗小鼠还是大鼠呀? 小云 2023-03-04 11:40:56
碧云爱答说: 2023-03-06 14:25:32
小鼠。
问:请问这款产品p2282与P2271有什么区别?通过产品介绍看起来两款产品对flag 蛋白的结合亲和力一致,P2271不需要保存在甘油中, 同时可重复使用的次数更多。请问p2282能否用于蛋白纯化,纯化不同蛋白能否需要对凝胶进行再生?因为P2271纯化不同蛋白需要对 凝胶进行再生处理:凝胶的再生:如果纯化相同蛋白,不用再生即可重复使用数次;如果纯化不同的蛋白,平衡后的凝胶需要按照下面 步骤进行再生。 1)用2倍柱体积的再生缓冲液1 (0.1 M Tris HCl, 0.5 M NaCl, pH 8.0)清洗。 2)用2倍柱体积的再生缓冲液2 (0.1 M sodium acetate, 0.5 M NaCl, pH 4.0)清洗。 3)用3-5倍柱体积的TBS再平衡,直至达到中性pH。 但P2282没有看到类似的说明,请问p2282能否使用同样的步骤再生?感谢您的回复! 小云 2023-01-30 17:41:02
碧云爱答说: 2023-02-01 09:33:42
产品简介中有两个产品的对比表格。P2282可以用于蛋白纯化,纯化不同蛋白需要再生,可以参考P2271的再生步骤
问:P2282和p2271产品简介中这两个产品的对比表格中区别是P2282含有4% agarose而不是经过交联的,请问P2282中4% agarose上Flag抗体是怎么结合上去的,直接通过普通的抗体与agarose孵育吗?麻烦详细解答,谢谢! 小云 2022-02-17 09:25:28
碧云爱答说: 2022-02-17 14:55:32
两款均为Flag抗体与琼脂糖共价偶联而成。
问:请问这个和p2271的区别是? 小云 2021-12-07 10:30:55
碧云爱答说: 2021-12-07 14:47:29
P2282产品简介中有这两个产品的对比表格,您可以查看下。
问:用这个凝胶还需要将带flag标签的蛋白先和flag抗体去孵育,然后在和凝胶孵育,还是直接去和凝胶孵育 小云 2021-10-26 12:17:13
碧云爱答说: 2021-10-26 14:10:11
碧云天生产的Anti-Flag Affinity Gel (Anti-Flag亲和凝胶)由高质量的鼠源Flag抗体与琼脂糖共价偶联而成,可与常规蛋白表达系统(如细菌、酵母或哺乳动物细胞)中含有Flag标签的蛋白结合,从而用于带有Flag标签的融合蛋白或蛋白复合物的纯化或免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)。可以直接孵育。
问:配合使用的各种洗脱液是和产品在一起还是需要自己单独配置 小云 2021-10-08 08:26:04
碧云爱答说: 2021-10-08 08:45:05
需要自行配置
问:P2271和P2181S哪个好用啊 小云 2021-09-08 20:28:45
碧云爱答说: 2021-09-09 14:16:39
一个是凝胶一个是磁珠,没有这么详细的对比数据,磁珠使用更方便些。