问:BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型),误放在-20℃保存,大概3天左右,请问影响有多大?对于结合His蛋白能力有何影响? 佚名 (游客) 2022-11-22 09:55:56

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碧云爱答(管理员)说: 2022-11-22 13:44:15
如果仅有一次冻存情况,应该可以正常使用的
问:蛋白纯化不挂柱子,跑流穿液条带依旧很粗,洗脱时能洗脱出极少量目的蛋白。蛋白似乎不挂柱子,只能挂住一点点 佚名 (游客) 2022-10-29 21:46:17

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碧云爱答(管理员)说: 2022-10-31 09:51:50
蛋白无法与BeyoGold™ His-tag Purification Resin结合 1. 测序检查基因序列的读码框是否正确。 2. 尝试将标签加在蛋白的另一端。 3. 增加BeyoGold™ His-tag Purification Resin与蛋白结合时间(如4℃过夜)。 4. 如果使用预装柱,可收集裂解液上柱后的穿流液并多次重复上柱。 5. 检查所有缓冲液和溶液的pH值是否正确。 6. 确认体系中所用各种试剂的浓度在镍柱的耐受范围以内。 7. 降低结合缓冲液中的咪唑浓度。如果仍无法解决,请提供详细实验条件和结果反馈至info@beyotime.com
问:非变性条件下纯化出来的蛋白可以直接在PBS里面透析吗 佚名 (游客) 2022-09-09 16:59:31

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碧云爱答(管理员)说: 2022-09-14 13:14:41
可以用非变性裂解液透析,PBS需要自行尝试,根据需要调整pH
问:请问,非变形裂解液可以用PBS代替吗? 佚名 (游客) 2022-08-08 10:28:18

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碧云爱答(管理员)说: 2022-08-09 15:23:12
可以尝试换PBS试试看。
佚名 (游客)说: 2022-08-09 14:39:08
那麻烦在问一下,非变形裂解液使用PBS代替后,其余液体也是在PBS里配置吗?
碧云爱答(管理员)说: 2022-08-08 14:10:00
也可以,PH最好在8.0左右。
问:请问里面裂解液是什么 佚名 (游客) 2022-08-02 16:51:06

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碧云爱答(管理员)说: 2022-08-03 11:05:52
详见使用说明“相关溶液配制方法”,包括大肠杆菌和哺乳动物细胞的裂解液
问:回收中各种溶液的加入体积用的是几倍柱体积,请问这个柱体积是BeyoGold™ His-tag Purification Resin 的加入体积,还是整个柱子的体积? 佚名 (游客) 2021-12-23 21:21:18

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碧云爱答(管理员)说: 2022-03-22 08:58:17
柱体积指的就是BeyoGold™ His-tag Purification Resin的体积。
问:‘目的蛋白与其它蛋白共同洗脱 1. 提高结合缓冲液和洗涤液中的咪唑浓度。’ 中结合缓冲液是什么 ??? 佚名 (游客) 2022-03-21 16:48:31

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碧云爱答(管理员)说: 2022-03-22 08:57:09
结合缓冲液是非变性裂解液。
问:注意事项说缓冲液SDS浓度不宜超过0.3%,但后面说镍柱重生要用2%SDS清洗,没有影响吗? 佚名 (游客) 2022-03-02 19:07:54

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碧云爱答(管理员)说: 2022-03-03 09:48:49
两者不冲突。
问:流速非常慢,有什么解决办法吗? 佚名 (游客) 2021-09-11 16:48:13

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碧云爱答(管理员)说: 2021-09-14 09:09:07
可以连接蠕动泵或者更换新的填料。
问:小量纯化后凝胶如何清洗保存? 佚名 (游客) 2021-09-07 14:03:29

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碧云爱答(管理员)说: 2021-09-08 10:55:48
20%乙醇4度放置。

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