问:用1x sample buffer洗脱后所有样品(包括IgG组和FLAG磁珠处理的未转染flag细胞组)在40kda左右有条明显的杂带,转膜后丽春红染色即可看出,孵育抗体后杂带更为明显,完全遮挡住目的条带,请问原因可能是什么
小云 2023-08-28 17:40:27
碧云爱答说: 2023-08-29 11:04:54
是否可以根据marker分辨到抗体的重链条带。变性洗脱一般会有抗体重链轻链的影响。
问:您好,我是用腺病毒感染细胞,腺病毒带了3Flag的标签,可以直接使用这个试剂盒吗,这样就不需要自己的Flag抗体或者本身的分子蛋白去做IP了吧 小云 2023-08-10 15:41:59
碧云爱答说: 2023-08-11 16:51:09
理论上可以
问:480μl的TBS+20μl的磁珠,重悬后很难用磁力架分离下来耶?一条很细的线,然后吸清液的时间就把磁珠吸下来了 小云 2023-07-13 00:08:11
碧云爱答说: 2023-07-14 15:37:50
用的哪款磁分离架,老师方便可以拍个小视频发送至info@beyotime.com
问:你好,请问竞争洗脱一次,蛋白浓度平均在多少呢? 小云 2023-05-17 09:43:50
碧云爱答说: 2023-05-18 16:30:31
无具体参考值,抱歉。每毫升磁珠悬浊液含约10mg磁珠,含有不少于0.6mg Flag抗体,通常可结合不少于0.6mg Flag标签融合蛋白,具体的最大结合量和标签蛋白的分子量大小等相关。
问:蛋白样品与磁珠四度孵育6-8小时可以吗 小云 2023-03-29 16:25:49
碧云爱答说: 2023-03-31 09:36:10
可以根据实际情况做这样的时间调整
问:这个试剂盒能检测1×FLAG的融合蛋白吗? 小云 2023-03-24 22:59:50
碧云爱答说: 2023-03-31 09:33:57
可以。
问:Flag磁珠可以重复使用吗 小云 2023-02-26 17:02:51
碧云爱答说: 2023-02-27 13:32:23
不重复使用
问:你好,我想问一下,如果最后洗脱下来的浓度较低,有没有什么办法浓缩液体提高蛋白浓度呢? 小云 2023-01-03 16:31:26
碧云爱答说: 2023-01-06 14:44:55
老师用的哪种洗脱方法?请提供下具体的结果到官网QQ、微信或者info@beyotime.com邮箱。
问:这个不用再买单独的抗flag抗体了是吗,我转染的质粒蛋白带flag标签,做完这个之后就可以做质谱了是吧 小云 2022-10-10 09:03:05
碧云爱答说: 2022-10-10 11:58:15
是的,BeyoMag™ Anti-Flag Magnetic Beads由Flag小鼠单克隆抗体与纳米级氨基磁珠共价偶联而成
问:你好,请问使用IgG磁珠进行预沉淀处理是可以消除非特异性结合条带吗?那我提取蛋白之后该如何进行预沉淀处理呢? 小云 2022-09-25 21:06:14
碧云爱答说: 2022-09-26 09:29:19
预处理体积同IP的体系,在IP前用IgG磁珠4度孵育1h,然后磁性分离,上清用于后续IP实验。