问:请问合成的Oligo dna片段用此buffer退火连接会在5’端带上磷酸基团吗?可以和酶切后的载体连接吗? 佚名 (游客) 2021-12-10 23:44:52

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碧云爱答(管理员)说: 2022-09-14 14:04:17
不能的,退火后不能加磷酸基团
问:请问可以在这个buffer中长期保存吗?如何纯化它?让其变成只有水和双链DNA的溶液,PCR回收合适吗? 佚名 (游客) 2022-07-26 08:56:28

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碧云爱答(管理员)说: 2022-08-02 14:28:45
可以-20℃长期保存。如需纯化,参考D0033 PCR纯化试剂盒/DNA纯化试剂盒或D0041S BeyoMag™磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒
问:武培莉: 请问你们的退火缓冲液有试剂背景菌吗 佚名 (游客) 2022-05-07 15:54:14

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碧云爱答(管理员)说: 2022-05-09 09:24:27
应该没有。
问:请问这个可以用于CRISPR sgRNA的退火么 佚名 (游客) 2022-03-01 11:20:07

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碧云爱答(管理员)说: 2022-03-01 16:59:33
不太确定具体效果,建议先做预实验尝试。
问:请问加样的时候先加的DNAoligo,后加水,后加酶,这样有影响吗? 佚名 (游客) 2022-02-26 09:26:48

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碧云爱答(管理员)说: 2022-03-01 11:50:20
如果已经加好了,先继续往下做。建议先加水。
问:请问这个buffer能用于dna oligo和rna的退火吗? 佚名 (游客) 2021-11-08 16:46:10

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碧云爱答(管理员)说: 2021-11-09 14:19:27
不适合的。
问:后续如果做EMSA一般使用的稀释梯度是多少。 佚名 (游客) 2021-09-13 09:34:17

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碧云爱答(管理员)说: 2021-09-14 08:55:02
具体要看EMSA试剂盒的要求进行确定。
问:请问用buffer退火生物素标记的探针后,想要稀释之后再用于EMSA,可以用ddH2O稀释吗,还是要用什么可以稀释?谢谢! 佚名 (游客) 2021-08-09 11:34:44

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碧云爱答(管理员)说: 2021-09-02 13:38:45
可以使用无核酸酶的水进行探针的稀释。
问:请问这个退火缓冲液里含有Tris、甘氨酸或者巯基吗?我想确定是否会影响反应体系的效率。 佚名 (游客) 2021-08-04 14:49:06

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碧云爱答(管理员)说: 2021-08-05 10:48:35
退火的过程不需要为加入其它试剂,直接使用就可以了。
问:请问要求均匀降温吗,PCR仪的降温速率只能调到0.1℃/s, 我们以10℃为梯度,设置多步保温步骤可以吗?比如94-84℃降温速率0.1℃/s, 保温10min,以此类推,一直到25摄氏度,谢谢解答。 佚名 (游客) 2021-04-28 13:35:01

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碧云爱答(管理员)说: 2021-04-29 10:41:39
如果达不到说明书标注的PCR仪梯度降温的条件,按照使用说明,使用保温杯也可以。

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