问:请问,caspase-1活性检测试剂盒与caspase-3活性检测试剂盒里面的检测缓冲液可以通用吗 小云 2019-04-26 17:33:15
碧云爱答说: 2019-04-28 09:04:15
检测缓冲液是不能通用的,裂解液和标准品是可以通用。
问:您好,我想问一下,按照说明书“同前吸尽上清后,按照每200万细胞加入100微升裂解液的比例加入裂解液(如果裂解不充分,可以把裂解液的用量提高至150或200微升)”,是不是加裂解液之前,各组要再记一次细胞数吗?一般这个细胞数是多少合适? 小云 2023-03-15 10:48:25
碧云爱答说: 2023-03-16 16:21:20
不需要计数,裂解样品时需设法使样品中的蛋白浓度至少达到1-3mg/ml,后续计算酶活后,可以除以待测样品相应的蛋白质量
问:离心后细胞需要用裂解液重悬,但是发现重悬不起来,细胞一直有团块,这种情况怎么处理?可以用超声裂解吗? 小云 2022-10-29 22:25:15
碧云爱答说: 2022-10-31 11:19:43
反复吹打试试,裂解液接触细胞即可裂解,不需要超声处理
问:我想问一下,提总蛋白的IP裂解液可以替代这个试剂盒里的裂解液吗?这个检测样品是上清液还是细胞悬液? 小云 2022-09-24 19:29:41
碧云爱答说: 2022-09-26 09:02:35
不能用Western及ip细胞裂解液进行替换,需要使用试剂盒自带的裂解液,裂解后离心取上清进行检测。
问:pNA标曲中的R2是怎么计算的? 小云 2022-03-31 12:00:06
碧云爱答说: 2022-03-31 15:03:01
拟合标曲方程时勾选“显示R平方值”即可。
问:前期收集细胞可以用1000转常温离心吗,为什么要用600转4℃离心? 小云 2021-12-13 10:17:43
碧云爱答说: 2021-12-15 13:41:25
通常600g够用了,如果细胞样品有差异,可以做适当调整。
问:你好! 我购买了Caspase1活性检测试剂盒(C1102)。根据说明书,最终检测的是“细胞裂解液”中Caspase 1的活性,但是我看有的文献上是检测细胞“上清液”的活性,也有文献是检测“裂解液+上清液”中的Caspase 1的活性。到底哪个才正确? 小云 2021-03-23 16:14:01
小云说: 2021-12-10 10:26:25
之前我也咨询了技术顾问,说他们没检测过上清里面的Cleaved-casp-1的活性。当时买试剂盒时也没注意到这个问题,而且碧云天没有casp-11活性的检测试剂盒
碧云爱答说: 2021-03-24 10:54:51
检测细胞内的Caspase更多一些。
问:请问技术员,最后caspase-1 activity的单位是uM?还是uM/g? 检测蛋白浓度后如何计算一个样品单位重量蛋白中所含的caspase 1的酶活力单位? 直接用测出来的浓度(uM)除以蛋白浓度(mg/ml)吗? 小云 2021-12-02 11:15:56
碧云爱答说: 2021-12-02 15:02:10
最终可以用计算出来的浓度除以蛋白浓度后表示结果umol/mg蛋白或者umol/g蛋白这种形似都是可以的。
问:待测样品至少含有10-30μg蛋白,是可以超过这个3mg/ml这个浓度吗? 小云 2021-08-30 15:54:24
碧云爱答说: 2021-08-30 16:41:23
要看您使用的样品体积了。
问:你好,请问贴壁细胞酶消化之后要终止消化再离心吗 小云 2021-08-23 11:34:49
碧云爱答说: 2021-08-23 14:14:36
需要的,终止消化离心去除。