问:您好,前算时间实验室在咱们这买的CaMKII一抗,反复好多次实验western blot在目的条带,都是两条,位于50-60KD,是有什么说法吗? 小云 2020-03-18 11:50:07
碧云爱答说: 2020-03-18 13:35:11
该抗体检测时的大小在54KD,老师目前是在50-60KD有两条带,是离得很近是吗?可以提供一下具体的图片。 Western出现非预期的条带是常见现象。一方面,这种情况可能是由于抗体的非特异性导致的,但这种情况下,通常非特异性的条带会比较弱。另一方面,出现的非预期的条带可能是目的蛋白的修饰或不同剪接、剪切或降解形式。 您可以使用其它不同的细胞或组织样品检测一下,看看该非特异性条带是否具有细胞或组织特异性。您也可以不管该条带,把胶浓度再适当调整或电泳时间再适当延长,以把目的条带和该非特异性的条带充分分开,可以明确检测您的目的条带即可。
问:是否可以做抗体封闭?
小云 2018-04-13 10:45:05
碧云爱答说: 2018-04-13 11:37:24
该产品是一抗,后续测试可以合适的封闭液进行封闭操作。