问:计算公式就是根据标准曲线来吗?
小云
2023-09-25 19:50:41
碧云爱答说:
2023-09-26 16:26:57
是的,根据标曲拟合出公式。
问:标准品是要自己买的吗 还是试剂盒里面有提供
小云
2023-09-24 14:27:44
碧云爱答说:
2023-09-25 10:52:42
试剂盒有提供标准品,GSSG。
问:请问测A412nm处的吸光值用什么样的酶标板,纯白色可以嘛,谢谢!
小云
2023-09-20 22:01:14
碧云爱答说:
2023-09-21 13:38:32
使用透明的96孔板进行检测。
问:试剂盒里其中一个试剂用完了,可以单独购买那一支试剂吗
小云
2023-09-19 01:22:25
碧云爱答说:
2023-09-19 14:31:19
非常抱歉,试剂盒不拆开销售。
问:用GSH清除剂处理样本后,样本中只剩GSSG,这个浓度是不是很低,和标曲一起做的,标曲颜色还是很明显,样本这边稍微有一点点一点点的变色,这种情况正常吗?
小云
2023-09-14 21:35:05
碧云爱答说:
2023-09-15 13:50:46
可以先看下吸光度值的结果。
问:这个可以用于测量细菌的吗
小云
2023-09-15 10:32:47
碧云爱答说:
2023-09-15 13:35:22
样品制备有些问题,需要先破壁,再用蛋白去除试剂M进行处理。
问:你好,想问下蛋白去除剂M是油性的吗?测重量是需要先测缓冲液后点点加入M吗?大概多少体积的M才能到0.1g呢?
小云
2023-09-11 13:52:28
碧云爱答说:
2023-09-11 16:07:51
蛋白去除试剂比较粘稠,对于组织样品,先液氮研磨,再加蛋白去除试剂M。
问:贴壁细胞经药物处理后,如无细胞裂解液的情况下,是刮下来按组织方式进行研磨嘛?细胞数量有要求嘛?
小云
2023-09-10 16:54:06
碧云爱答说:
2023-09-11 10:18:22
b.细胞样品的准备。请尽量使用新鲜的细胞进行测定,而不要使用冻存的细胞进行测定。PBS洗涤细胞一次,离心收集细胞,吸尽上清。加入细胞沉淀体积3倍量的蛋白去除试剂M溶液,即如果细胞沉淀为10微升,则加入30微升蛋白去除试剂M溶液,充分Vortex。(细胞沉淀的体积可以根据细胞沉淀的重量进行估算。收集细胞前后分别对离心管进行称重,从而就可以计算出细胞沉淀的重量。10毫克细胞沉淀的体积可以粗略地看做10微升。) 然后利用液氮和37℃水浴对样品进行两次快速的冻融。4℃或冰浴放置5分钟。4℃,10,000g离心10分钟。取上清用于总谷胱甘肽的测定。样品需暂时4℃保存,不立即测定的样品可以-70℃保存,但不宜超过10天。对于处理好的细胞样品通常需用蛋白去除试剂M溶液进行适当稀释后再进行测定,稀释倍数可以高达20倍。
问:做一次检测最少需要10mg组织吗
小云
2023-09-03 19:46:41
碧云爱答说:
2023-09-04 09:25:59
是的。
问:组织样本如何快速批量准备?若无法保证准确称量10mg组织样本,需要后续BCA定量吗?匀浆可以用磁珠然后试用研磨仪匀浆吗?
小云
2023-08-21 15:59:45
碧云爱答说:
2023-08-22 16:02:44
因为使用蛋白去除试剂M进行组织样品的匀浆,后续不能用BCA进行蛋白定量,所以需要前期进行组织的称重。研磨仪是可以的,需要确保可以在ep管中进行操作,匀浆的体系非常小。