问：这个是变性还是非变性的，如果样品浓度高，用裂解液稀释后还需要加这个上样缓冲液么
小云
2023-09-22 20:59:34
碧云爱答说：
2023-09-25 11:15:34
变性还原的loading buffer。如果是为了调平各组别上样体积，需要加入1×的buffer.
问：请问直接加loading收取贴壁细胞样品，会存在蛋白降解的风险吗？
小云
2023-09-24 16:48:23
碧云爱答说：
2023-09-25 10:43:30
一般用1×的loading buffer，重悬细胞再煮沸是为了裂解细胞。
问：蛋白有高分子杂带，如果考虑二聚体，可以倍量加入5xLB吗，还是添加SDS？
小云
2023-09-25 10:29:52
碧云爱答说：
2023-09-25 10:45:27
如果要打开二聚体，可以加还原剂DTT。
问：5*蛋白上样缓冲液，按比例加过后，太过于粘稠（煮沸了两次还是），BCA定量后，电泳的时候上样量多的在浓缩胶里都跑不动，上样量少的跑得快，就不一致了，有什么建议吗
小云
2023-09-25 08:29:04
碧云爱答说：
2023-09-25 10:15:50
loading 可以温浴促进完全溶解，另外与蛋白样品混合后可以煮沸10分钟。
问：上样时样品会溢到电泳液里，导致电泳液里飘着很多蓝色，飘得到处都是，有什么解决办法吗
小云
2023-09-01 17:01:35
碧云爱答说：
2023-09-04 13:26:16
loading buffer需要溶解完全并混匀后再使用。
问：上样时样品会溢到电泳液里，会影响旁边的上样孔吗
小云
2023-08-31 17:23:09
碧云爱答说：
2023-09-01 10:24:19
可能会有影响的。
问：想了解下该SDS-PAGE蛋白上样缓冲液的具体成分是什么？能否用于tricine-sds-page？
期待进一步交流！
小云
2023-08-16 19:12:26
碧云爱答说：
2023-08-17 08:46:59
Tricine的变性电泳可以使用以下的loading buffer：https://www.beyotime.com/product/P0750-2ml.htm
问：请问煮样时无沉淀，第二天拿出来上样时，吸取时发现出现沉淀是怎么回事
小云
2023-08-06 21:31:23
碧云爱答说：
2023-08-11 08:48:11
可能和样品离子浓度有关，温度变化后出现沉淀，上样前高速离心一下
问：可以放在-80度的冰箱中保存吗？
小云
2023-07-31 11:04:05
碧云爱答说：
2023-08-02 14:38:37
可以。
问：请问下需要的蛋白浓度比较高，例如54ug蛋白，1.8uLSDS够用吗？【是5:1的关系，7.2uL样品，1.8uLSDS loading】。
小云
2023-07-26 10:44:45
碧云爱答说：
2023-07-28 15:16:38
“7.2uL样品，1.8uLSDS loading”这个是符合要求的，您是要加更少的loading？