克隆阳性率低？用“神器”处理下试试！
话不多说，上实例:
pU6-gRNA-Cas9-T2A-mOrange2质粒酶切后未用“神器”处理，菌落多，但克隆阳性率低:
pU6-gRNA-Cas9-T2A-mOrange2质粒酶切后使用“神器”—Bacterial Alkaline Phosphatase处理30分钟，阳性率大大增加！
解密
经限制性内切酶酶切的质粒5'端带有磷酸基团，在进行基因克隆时为避免质粒自连，碧云天Bacterial Alkaline Phosphatase通过去除5'末端磷酸基团，从而使质粒不能发生自连。
除此之外，碧云天Bacterial Alkaline Phosphatase还有其他优势：
- 超高兼容：在碧云天的各种内切酶和几乎所有的PCR缓冲液中可达到100%活性！
- 超高酶活：经实验验证（见下图）本产品酶活性与国外知名品牌相同产品具有相同甚至更优酶活性！
- 温度广谱：在37-65ºC温度范围内都具有较高活性！
- 底物广谱：可以非特异性催化几乎所有的磷酸单酯的去磷酸化！
- 用途广谱：通过去除载体或DNA片段5'末端的磷酸基团，防止载体或DNA片段自连；质粒DNA的同时进行内切酶消化和去除5'端磷酸基团；通过5'末端脱磷，为5'末端磷酸放射性标记准备模板；去除DNA、RNA 5'或3'末端的磷酸基团；用于磷酸化蛋白丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的去磷酸化。
- 热稳定性好：65ºC仍可以保持活性一个小时，即使在含有螯合剂和100ºC加热的条件下也只是暂时失活，必须进行苯酚处理才能使其完全失活！
- 操作简单：对于5'或3'突出末端、平端等各种DNA的去磷酸化采用完全相同的操作步骤。
碧云天Bacterial Alkaline Phosphatase (D7031)酶活性检测效果结果图。如图所示，本产品(Beyotime)与T公司(Competitor)有相似的酶活性。
产品信息
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
| D7031S | Bacterial Alkaline Phosphatase | 50U | |
| D7031M | Bacterial Alkaline Phosphatase | 250U |