随着3D细胞培养技术的日益成熟，3D细胞培养技术已经成为非常常用的研究工具，也越来越受欢迎，在基础研究和药物发现等中的应用越来越广泛。在细胞研究中，对细胞活性及细胞毒理的检测是一项基本的细胞学技术，而3D培养条件下的细胞活性检测也成为一大难点。

今天小编给大家推荐一款碧云天新上架产品Cell Counting Kit-3D (CCK-3D试剂盒)（C0049），本试剂盒约1小时即可完成检测，对细胞的毒性非常低，检测完成后的细胞还可以继续培养使用。

Cell Counting Kit-3D (CCK-3D试剂盒)

碧云天研发生产的Cell Counting Kit-3D，简称CCK-3D试剂盒或CCK3D试剂盒，是一种基于WST系列生色底物用于3D细胞活力、增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。本试剂盒适用于在450nm左右测定吸光度，通常约1小时即可完成检测。

产品原理：
WST系列生色底物，例如WST-1、WST-8等，是一系列类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。本试剂盒经过多方面的反复优化，通过测定formazan的吸光度就可以非常高效、线性、准确地测定3D细胞球的总体细胞活力。

图1.碧云天Cell Counting Kit-3D (CCK-3D试剂盒)(C0049)检测原理图 (EC=Electron coupling reagent，即电子耦合试剂)。

产品特点：
应用广泛：
用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测；
使用便捷：
试剂盒仅一管已经配制好的CCK-3D溶液，无须再进行任何配制等操作。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。
细胞毒性小：
加入CCK-3D溶液显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到最佳测定时间。
使用灵活：
不仅适合少量样品的检测，也非常适合大量样品的高通量筛选(High-throughput screening)检测，可用于各种培养方法培养出的含细胞培养液的3D细胞球，包括细胞悬滴培养板、超低吸附细胞培养板、Matrix-Gel™基质胶或Matrigel包被的平板、琼脂糖包被的平板等。

产品效果：

图2：碧云天Cell Counting Kit-3D (CCK-3D试剂盒) (C0049)对不同数量MOLM-13和HCT-116细胞在3D细胞培养48小时后的检测效果图。不同数量的HCT-116和MOLM-13细胞100μl每孔接种于康宁^®球体微孔板(Corning^® 96-well Black/Clear Round Bottom Ultra-Low Attachment Surface Spheroid Microplate, Cat.4515/4520)进行3D培养，培养48小时后每孔各加入本产品10μl，孵育1小时后测定A450，在1万个细胞内信号强度与细胞数之间的线性较好，细胞数量超过1万、或者孵育时间超过1小时后可能会不呈现线性关系，但信号值还是会继续升高。实测数据会因具体实验条件的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

碧云天同时提供CellTiter-Lumi™发光法3D细胞活力检测试剂盒(C0061/C0062)，该试剂盒是通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而用于超高灵敏度、高信号稳定性定量检测3D培养细胞总体活性。有需要的小伙伴可以根据自己的需求挑选适合的产品哦！

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