高分利器|4000余种基因敲除库上线啦!
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CRISPR/Cas9是一项突破性的基因组编辑技术,操作便捷,应用广泛。CRISPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats)是一种原核生物利用RNA引导的DNA核酸酶Cas9对外源的噬菌体或病毒核酸进行基因沉默的获得性免疫系统(adaptive immune system),后续在此基础上逐渐发展为广泛应用于原核和真核生物的越来越成熟的基因编辑技术。该技术能够在gRNA引导下通过Cas9对原核和真核生物的基因组DNA的靶向序列进行位点特异性的切割,然后通过易错修复(error-prone repair)或同源重组(homologous recombination)在切割位点改变或插入序列来产生移码突变,从而通过基因编辑而实现基因敲除。其中gRNA确保识别位点的特异性。随着CRISPR技术的发展,该技术目前不仅可以实现基因敲除,还可以实现基因的点突变、插入突变等多种突变方式,特别是在临床应用方面可以用于修复不良突变等。同时通过构建没有内切酶活性的Cas9突变体dCas9,通过与dCas9直接融合表达或间接招募转录激活或转录抑制因子,可以实现sgRNA靶向基因的转录激活或转录抑制。

基于CRISPR/Cas9技术,碧云天上线了针对4000多个基因的敲除共20000余种产品,包括目的基因敲除质粒慢病毒HEK293T细胞 HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液等产品 ,涵盖细胞增殖、凋亡、自噬、代谢等绝大多数研究领域。

比如针对GAPDH基因的敲除,有质粒、慢病毒、已敲除目的基因的HEK293T细胞和对应的RIPA裂解液、Trizol裂解液可以选择。更多产品请点击了解

产品特点:
标准严格:质粒中的sgRNA、慢病毒和细胞中目的基因的敲除已经通过金标准T7E1法验证;
产品丰富:提供分别针对4000余种目的基因敲除的系列产品,如细胞凋亡、线粒体自噬、表观遗传调控、cAMP & Ca 信号通路相关、糖尿病等多领域研究相关基因,可轻松选择想要敲除的目的基因产品;
方便快捷:每种目的基因提供相应的敲除质粒、慢病毒、HEK293T细胞及细胞裂解液产品,可根据实验需求选择相应研究工具。

接下来让我们分别了解下这几类产品吧~(文末有福利哦)

目的基因敲除质粒(库)

碧云天提供可以在动物细胞中同时表达Cas9、人源目的基因sgRNA和puromycin抗性基因的质粒,本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除,以及通过puromycin筛选稳定细胞株;也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装,然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。

图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。

目的基因敲除慢病毒(库))

碧云天提供感染动物细胞后可以同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因的慢病毒。本慢病毒可用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。

目的基因敲除HEK293T细胞敲除(库)

目的基因敲除HEK293T细胞是通过同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因,并实现了目的基因CRISPR敲除的HEK293T细胞。本系列细胞株是多克隆细胞,可用于该目的基因的生物学功能研究,也可以用于该基因相应抗体的验证。

*由于本细胞是通过CRISPR/Cas9技术获得的多克隆细胞,基于CRISPR/Cas9技术的特点,理论上平均有2/3的细胞发生移码突变而导致了目的基因的敲除,平均有1/3的细胞并未发生移码突变。很多情况下有约2/3的细胞发生目的基因的敲除,已经足以进行很多的目的基因的生物学功能的研究了。如果希望获得100%基因敲除的细胞,可以自行使用本产品筛选单克隆细胞,或者委托碧云天进行单克隆细胞株的筛选服务。

目的基因敲除HEK293T细胞RIPA裂解液

目的基因敲除HEK293T细胞RIPA裂解液是通过同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因并实现了目的基因CRISPR敲除的多克隆HEK293T细胞的RIPA裂解液。本产品可用于该目的基因敲除后其信号通路相关蛋白的研究,也可以用于该基因相应抗体的验证。

目的基因敲除HEK293T细胞Trizol裂解液

目的基因敲除HEK293T细胞Trizol裂解液是通过同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因,并实现了目的基因CRISPR敲除的多克隆HEK293T细胞的Trizol裂解液。本产品可用于该目的基因敲除后其信号通路相关RNA表达的研究。

福利来啦!
即日起到6月30日,凡订购本系列产品即赠送相应对照,赠送产品如下:
a. 对于质粒产品:赠送无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)
b. 对于慢病毒产品:赠送无任何靶向的对照慢病毒Control Knockout Lentivirus (L00015)
c. 对于293T细胞产品:赠送无任何靶向的对照细胞Control Knockout HEK293T Cells (L00020)
d. 对于RIPA裂解液产品:赠送无任何靶向的对照细胞RIPA裂解液Control Knockout HEK293T RIPA Lysate (L00025)
e. 对于Trizol裂解液产品:赠送无任何靶向的对照细胞Trizol裂解液Control Knockout HEK293T Trizol Lysate (L00031)

本系列产品为技术服务定制产品,有一定的货期,请小伙伴们稍微耐心等待。