超灵敏的磷酸根荧光检测试剂盒全新上线!
更多特色产品>>

碧云天全新推出超高灵敏度的磷酸根荧光检测试剂盒!利用荧光基团标记的重组磷酸根结合蛋白轻松检测样品溶液中无机磷酸根水平,以及ATP酶、GTP酶、磷酸酶和磷酸二酯酶等酶的活性。

产品原理:
本试剂盒所采用的Phosphate Sensor是用环境敏感型荧光基团MDCC标记的大肠杆菌磷酸根结合蛋白A197C突变体重组蛋白,其对无机磷酸根高度敏感,能和无机磷酸根快速并紧密结合,结合后传感器蛋白会发生明显的构象变化,导致荧光强度明显增强

检测效果

图1. 磷酸根荧光检测试剂盒中Phosphate Sensor结合无机磷酸根前后的荧光信号差异。检测体系(20μl): 5μM Phosphate Sensor, 0或1mM Phosphate Standard,1X检测缓冲液。依次将10μl 0或2mM Phosphate Standard和10μl 10μM Phosphate Sensor加入384孔黑板。采用荧光酶标仪在25℃ 430nm激发光条件下进行不同发射光波长的荧光测定,每组实验体系重复三次并取平均值。当反应体系中不加入无机磷酸根时,Phosphate Sensor在430nm激发光条件下的最大发射波长约为474nm;当反应体系中加入无机磷酸根时,Phosphate Sensor在430nm激发光条件下的最大发射波长约为465nm (图1A)。当激发光/发射光分别为430nm/450nm时,Phosphate Sensor在无机磷酸根结合前后的荧光信号差异最显著(图1B)。

产品特点:
灵敏度高
最低100nM的无机磷酸根与Phosphate Sensor结合即可导致其发生明显的荧光增强。
线性范围宽
本产品检测无机磷酸根的敏感范围约在100mM-5μM之间,比传统的孔雀绿磷酸根检测方法敏感约100倍以上。
使用便捷
本产品在检测过程中操作简单,使用方便,通常10-30个样品可以在30-60分钟内完成测定。

图2. Phosphate Sensor Assay Kit (磷酸根荧光检测试剂盒)中Phosphate Sensor结合无机磷酸根的标准曲线。检测体系(20μl): 5μM Phosphate Sensor,1X检测缓冲液,0-1mM Phosphate Standard。依次将10μl 0-2mM Phosphate Standard和10μl 10μM Phosphate Sensor加入384孔黑板(具体浓度的Phosphate Standard和Phosphate Sensor均由本试剂盒提供的试剂经1X检测缓冲液稀释获得)。采用荧光酶标仪在25℃激发光/发射光波长分别为430nm/450nm条件下进行荧光测定,每组实验体系重复三次。利用GraphPad Prism软件中的“variable slope”模型
[Y=Bottom+Top-Bottom)/(1+10^((LogEC50-X)*HillSlope))]拟合出标准曲线。不同实验条件的检测数据会略有差异,图中数据仅供参考。

订购信息:

产品编号 产品名称 包装 产品价格
S0192S Phosphate Sensor Assay Kit (磷酸根荧光检测试剂盒) 200次
S0192M Phosphate Sensor Assay Kit (磷酸根荧光检测试剂盒) 1000次