秋冬季节是流感易发季节,最近国内多地出现新冠疫情确诊病例,平复许久的心又起涟漪,着实有些揪心,疫情当前,大家必须时刻保持警惕,加强防范,不可松懈。
碧云天心系疫情,为助力抗疫又出新品,研发出荧光信号更强、筛选效果更佳的新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒(增强型) (Enhanced 2019-nCoV Mpro/3CLpro Inhibitor Screening Kit) (P0315),本试剂盒是一种利用荧光检测,简单、快速、灵敏地用于新型冠状病毒Mpro/3CLpro蛋白酶抑制剂高通量筛选的试剂盒。
本试剂盒使用MCA荧光底物,荧光信号约为新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒(P0312)的2倍,筛选效果更佳。对于筛选出来的有效的抑制剂,本试剂盒也可以和新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒(P0312)相互验证。
产品原理
本试剂盒采用荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer, FRET)的方法,其检测原理如下。MCA是荧光供体(Donor),Dnp是荧光受体(Acceptor)或称为淬灭基团(Quencher),这两个荧光基团的吸收光谱有一定的重叠,当这两个荧光基团间的距离合适时(一般7-10nm),荧光能量由供体向受体转移,导致供体荧光分子自身的荧光强度衰减。MCA和Dnp被连接到2019-nCoV Mpro/3CLpro 蛋白酶的天然底物(Substrate)的两端,即MCA-AVLQSGFR-Lys(Dnp)-Lys-NH2。当2019-nCoV Mpro/3CLpro蛋白酶没有切割该底物时,两个基团足够接近,发生荧光共振能量转移,即Dnp可淬灭MCA荧光而导致检测不到荧光;当该底物被2019-nCoV Mpro/3CLpro蛋白酶切割后,多肽的首尾两端分离,两个基团分开,MCA荧光不再被Dnp淬灭,即可检测到MCA荧光,这样通过荧光检测就可以非常灵敏地检测2019-nCoV Mpro/3CLpro蛋白酶的酶活性。如果在反应体系中加入2019-nCoV Mpro/3CLpro的抑制剂(Inhibitor),荧光的生成会被抑制,荧光强度与抑制剂的抑制效果成反比,这样就可以检测出2019-nCoV Mpro/3CLpro蛋白酶抑制剂的抑制效果
新型冠状病毒(2019-nCoV) Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒(增强型)检测Mpro/3CLpro酶活性的原理图。
产品特点:
本试剂盒抑制剂筛选结果更加真实可信。本试剂盒中使用的2019-nCoV Mpro/3CLpro是碧云天采用自主研发的PerfectProtein™蛋白表达技术平台纯化而来,使表达的重组2019-nCoV Mpro/3CLpro蛋白没有任何额外的标签,没有任何一个额外的氨基酸,确保与 2019-nCoV病毒的Mpro/3CLpro氨基酸序列完全一致。采用本试剂盒用于新型冠状病毒抑制剂的筛选,可确保筛选获得的抑制剂更加真实可信,避免因为存在的额外氨基酸而筛选出“假阳性”的抑制剂。
本试剂盒兼容性强。常用溶剂如DMSO、无水乙醇、甘油等对本试剂盒的检测结果影响较小,实测反应体系中DMSO或无 水乙醇、甘油含量达10%时对检测结果基本没有影响,含量达20%时孵育10分钟的信号下降不超过10%;去垢剂如Triton X-100等的含量在低于0.9%时孵育10分钟基本无影响。
本试剂盒信号稳定性好,信号更强。孵育5分钟后,信号即趋于稳定并在20分钟内几乎没有变化。同时,本试剂盒100%酶活性的信号值约为新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒(P0312)的2倍,确保有更宽泛的信号范围用于抑制剂的筛选,效果更佳。
检测效果
新型冠状病毒(2019-nCoV) Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒(增强型)检测Ebselen的效果图。
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
P0315S | 新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒(增强型) | 100次 | |
P0315M | 新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒(增强型) | 500次 | |
P0312S | 新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒 | 100次 | |
P0312M | 新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒 | 500次 | |
P0313S | 冠状病毒Mpro/3CLpro活性荧光检测试剂盒 | 100次 | |
P0313M | 冠状病毒Mpro/3CLpro活性荧光检测试剂盒 | 500次 | |
P9733-0.1ml | Dabcyl-KTSAVLQSGFRKME-Edans (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 20mM×0.1ml | |
P9733-5mg | Dabcyl-KTSAVLQSGFRKME-Edans (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 5mg | |
P9733-25mg | Dabcyl-KTSAVLQSGFRKME-Edans (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 25mg | |
P9731-0.1ml | MCA-AVLQSGFR-Lys(Dnp)-Lys-NH2 (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 20mM×0.1ml | |
P9731-5mg | MCA-AVLQSGFR-Lys(Dnp)-Lys-NH2 (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 5mg | |
P9731-25mg | MCA-AVLQSGFR-Lys(Dnp)-Lys-NH2 (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 25mg |