天冷了,国庆长假和中秋佳节携手走来了,很多人都计划着十一出行,想从忙碌的生活中给自己一个放松的机会。
然而,新冠病毒这个凶猛又狡猾的家伙,依然没有离开。
前几天,张文宏教授表示,接下来的冬天「第二波疫情是必然的」。
目前对于抗新冠病毒药物的筛选和研究,仍刻不容缓。
新型冠状病毒主蛋白酶Mpro也被称为3C-like protease (3CLpro),因为其切割位点的特异性与微小RNA病毒(picornavirus)的3C蛋白酶(3C protease)很相似,两者并称为Mpro/3CLpro。由于Mpro蛋白酶在病毒的生命周期中起到了至关重要的作用,且人体内没有同源蛋白,故Mpro主蛋白酶是一个抗病毒药物研发的理想靶点。
自2003年SARS爆发后,已有大量基于Mpro结构为基础的抗SARS药物的研究。Lopinavir(洛匹那韦)与Ritonavir(利托那韦)等抗HIV药物也是作用于类似的蛋白酶靶点,并在临床上得到很好的验证。同时,Mpro在β冠状病毒中保守性高,筛选出的Mpro抑制剂具有一定程度的广谱抗冠状病毒能力,甚至可能用于猪冠状病毒等相关的其它动物疾病的治疗。
碧云天研发生产的新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒(2019-nCoV Mpro/3CLpro Inhibitor Screening Kit)是一种利用荧光检测,简单、快速、灵敏地用于新型冠状病毒Mpro/3CLpro蛋白酶抑制剂高通量筛选的试剂盒。本试剂盒使用的是和天然新型冠状病毒主蛋白酶的氨基酸序列完全相同的新型冠状病毒Mpro/3CLpro蛋白酶,没有任何额外的标签和氨基酸,确保筛选结果更加真实可信。
P0312S 新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒
产品原理:
本试剂盒采用荧光共振能量转移(FRET)的方法,其检测原理如下。Edans是荧光供体(Donor),Dabcyl是荧光受体(Acceptor)或称为淬灭基团(Quencher)当这两个荧光基团间的距离合适时(一般7-10nm),荧光能量由供体向受体转移,导致供体荧光分子自身的荧光强度衰减。Edans和Dabcyl被连接到2019-nCoV Mpro/3CLpro蛋白酶的天然底物上的两端,当2019-nCoV Mpro/3CLpro蛋白酶没有切割该底物时,两个基团足够接近,Dabcyl可淬灭Edans的荧光而导致检测不到荧光;当该底物被2019-nCoV Mpro/3CLpro蛋白酶切割后,多肽的首尾两端分离,两个基团分开,Edans的荧光不再被Dabcyl淬灭,即可检测到Edans的荧光,这样通过荧光检测就可以非常灵敏地检测2019-nCoV Mpro/3CLpro蛋白酶的酶活性。如果在反应体系中加入2019-nCoV Mpro/3CLpro的抑制剂(Inhibitor),荧光的生成会被抑制,荧光强度与抑制剂的抑制效果成反比,这样就可以检测出2019-nCoV Mpro/3CLpro蛋白酶抑制剂的抑制效果。
图1. 新型冠状病毒(2019-nCoV) Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒检测Mpro/3CLpro酶活性的原理图。
产品特点:
筛选结果更加真实可信 本试剂盒中使用的2019-nCoV Mpro/3CLpro蛋白与2019-nCoV病毒的Mpro/3CLpro氨基酸序列完全一致。采用本试剂盒用于新型冠状病毒抑制剂的筛选,可确保筛选获得的抑制剂更加真实可信,避免因为存在的额外氨基酸而筛选出“假阳性”的抑制剂。
兼容性强 常用溶剂如DMSO、无水乙醇、甘油等对本试剂盒的检测结果影响较小。
信号稳定性好,信号佳 孵育5分钟后,信号即趋于稳定并在20分钟内几乎没有变化。同时,100%酶活性信号约为背景信号的20倍,确保有足够的信号范围用于抑制剂的筛选。
检测效果
图2. 新型冠状病毒(2019-nCoV) Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒检测Ebselen的效果图。实际检测结果可能会因样品和检测条件等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
除了抑制剂筛选试剂盒还有冠状病毒主蛋白酶Mpro/3CLpro活性检测试剂盒哟!
冠状病毒Mpro/3CLpro活性荧光检测试剂盒(Coronavirus Mpro/3CLpro Activity Fluorometric Assay Kit)是采用荧光共振能量转移(FRET)的方法快速高灵敏检测冠状病毒主蛋白酶(main protease, 简称Mpro,也称3C-like protease,简称3CLpro)活性的试剂盒。本试剂盒可以检测不同类型样本的冠状病毒Mpro/3CLpro酶活力,包括新冠病毒、含新冠病毒的细胞或动物组织、表达Mpro/3CLpro酶的细胞或组织裂解液或纯化的Mpro/3CLpro酶等。
P0313S 冠状病毒Mpro/3CLpro活性荧光检测试剂盒
产品原理
本试剂盒采用荧光共振能量转移(FRET)的方法,其检测原理如下。MCA是荧光供体(Donor),Dnp是荧光受体(Acceptor)或称为淬灭基团(Quencher)。本试剂盒内提供了MCA标准溶液,MCA标准品在0.2-50μM范围内有良好的线性关系。可以通过设置标准曲线,计算出样品中Mpro/3CLpro蛋白酶的活性。
图3. 碧云天冠状病毒Mpro/3CLpro活性荧光检测试剂盒检测原理图。
检测效果
图4. 碧云天冠状病毒Mpro/3CLpro活性荧光检测试剂盒的MCA标准曲线和2019-nCoV Mpro/3CLpro阳性对照检测效果图。本试剂盒的MCA标准品的标准曲线示意图见图A。不同量的2019-nCoV Mpro/3CLpro酶切底物生成产物的荧光强度示意图见图B。实际检测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
此外,碧云天还全新上线了多种新冠病毒主蛋白酶及其荧光底物,全面助力新型冠状病毒抑制剂的筛选、酶活性研究或结构研究。
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产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
P0312S | 新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒 | 100次 | |
P0312M | 新型冠状病毒Mpro/3CLpro抑制剂筛选试剂盒 | 500次 | |
P0313S | 冠状病毒Mpro/3CLpro活性荧光检测试剂盒 | 100次 | |
P0313M | 冠状病毒Mpro/3CLpro活性荧光检测试剂盒 | 500次 | |
P2320-1mg | 2019-nCoV Main Protease (新型冠状病毒主蛋白酶) | 1mg | |
P2320-200μg | 2019-nCoV Main Protease (新型冠状病毒主蛋白酶) | 200μg | |
P9733-0.1ml | Dabcyl-KTSAVLQSGFRKME-Edans (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 20mM×0.1ml | |
P9733-5mg | Dabcyl-KTSAVLQSGFRKME-Edans (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 5mg | |
P9733-25mg | Dabcyl-KTSAVLQSGFRKME-Edans (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 25mg | |
P9731-0.1ml | MCA-AVLQSGFR-Lys(Dnp)-Lys-NH2 (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 20mM×0.1ml | |
P9731-5mg | MCA-AVLQSGFR-Lys(Dnp)-Lys-NH2 (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 5mg | |
P9731-25mg | MCA-AVLQSGFR-Lys(Dnp)-Lys-NH2 (冠状病毒主蛋白酶荧光底物) | 25mg |