自COVID-19新型冠状病毒爆发以来，世界各地的人们历经生死考验，生命安全和健康面临重大威胁，全球卫生系统面临空前的冲击，这是一场全人类与病毒的战争。据美国约翰霍普金斯大学的统计显示，截至目前，全球确诊感染新型冠状病毒人数突破700万，超过40万人死亡。其中美国已有新冠病毒感染病例超193万例，死亡病例突破11万人。6月7日，上海市新冠肺炎医疗救治专家组组长张文宏接受采访表示：全球第二波疫情已呼之欲出。目前全球新冠肺炎疫情仍然是最牵动人心的话题。

碧云天重磅推出新型冠状病毒(2019-nCoV)双荧光qRT-PCR试剂盒！本试剂盒是基于ORF1ab基因和N基因的双荧光探针的用于新型冠状病毒(2019-nCoV/SARS-CoV-2)核酸检测的试剂盒。本试剂盒经过假病毒验证，可以免RNA抽提而直接用于RNA病毒样品的检测，使用非常便捷。
检测原理：
本试剂盒以新型冠状病毒ORF1ab基因和N基因中的保守区为靶点，参考中国疾病预防控制中心提供的新型冠状病毒核酸检测引物和探针序列，并经过优化而研发的新型冠状毒核酸检测试剂盒。每条检测探针的5'端标记FAM或VIC荧光基团，3'端标记TAMRA或BHQ1淬灭基团。扩增之前探针上的淬灭基团由于空间上的荧光共振能力转移(FRET)而导致荧光基团淬灭。PCR反应时，引物和探针都会退火到目标基因上，随着引物的延伸，Taq酶的5'→3'外切酶活性会导致结合在目标基因上的探针从5'端开始逐渐被降解。探针的荧光基团和淬灭基团被Taq酶切开后，淬灭基团的作用消失，荧光基团就能正常地被激发光所激发而产生荧光。每经过一个PCR循环，就会有更多的荧光基团被释放，荧光强度与新合成的目标片段数量成正比，荧光定量PCR仪可根据检测到的荧光信号绘制出实时扩增曲线，从而实现对新冠状病毒(2019-nCoV)在核酸水平上的检测。
产品特点：
可免RNA抽提而直接用于病毒的核酸检测：
本试剂盒经假病毒模拟咽拭子、唾液样品验证，可以适用于保存于病毒保存液中的RNA病毒样品的直接检测，无须进行RNA的抽提，使用非常便捷；
操作简单、使用便捷：
本试剂盒包含了BeyoRT™ M-MLV反转录酶、BeyoFast™ Taq DNA Polymerase、引物、探针、PCR Buffer、dNTPs、稳定剂、Nuclease-free Water和镁离子等所有的通用组分，用户只需自备样品RNA或者RNA病毒样本即可；
兼容性好：适用于具有FAM和VIC/HEX/JOE检测通道的荧光定量PCR仪，如ABI的7500、7900、StepOne、QuantStudio系列，Roche的LightCycler480、SmartCycler，Bio-Rad的CFX96、Chromo4、Opticon 2、iCycler IQ、iQ5，Qiagen的Rotor Gene 6000，上海宏石SLAN-96P等。

产品效果：
本试剂盒的检测下限为500-1000 copies/ml。用于阳性质粒检测的平均Ct值见下表，检测效果参考图1。

Target	100pg	10pg	1pg	0.1pg	0.01pg	0pg
N-FAM	13.28	16.73	20.02	23.36	26.85	Undetermined
ORF1ab-VIC	13.12	16.41	19.82	23.17	26.73	Undetermined

图1. 新型冠状病毒(2019-nCoV)双荧光qRT-PCR试剂盒用于阳性质粒的检测效果图。将本试剂盒中的Novel CoV (2019-nCoV) Positive control稀释至每反应中的每个质粒量分别为100、10、1、0. 1、0.01pg，然后用本试剂盒进行双荧光qRT-PCR检测。由于阳性质粒是超螺旋的，其检测灵敏度远低于线性化的质粒，不能直接用超螺旋质粒的检测灵敏度去计算检测下限。实测数据可能会因样品、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

本试剂盒经假病毒模拟咽拭子、唾液样品验证，可以适用于保存于病毒保存液中的RNA病毒样品的直接检测，无须进行RNA的抽提，使用非常便捷，相关结果参考下表。

样本处理方式		病毒RNA抽提试剂盒提取			直接法
病毒量(IU)		400	40	4	400	40	4
Ct值	复孔1	24.58	27.93	32.19	25.39	28.97	32.04
	复孔2	25.07	28.27	31.58	25.12	28.68	31.00
	复孔3	25.21	28.05	31.73	25.13	28.90	31.31
	平均值	24.95	28.09	31.84	25.21	28.85	31.45

表1. 不同数量的新冠病毒N基因慢病毒保存在含咽拭子的TE溶液中，RNAeasy™病毒RNA抽提试剂盒(离心柱式) (R0035S/M/L)提取病毒后或未经抽提直接使用本试剂盒进行qRT-PCR检测。病毒量是指每个PCR反应体系中病毒的IU (Infection Unit)数。注：实际操作时，须根据病毒样本的来源、保存液类型进行一定的验证测试。IU数为具有生物活性的病毒颗粒数，实际病毒的拷贝数可能是IU数的10-1000倍。

产品信息：

产品编号	产品名称	包装	产品价格
D8006S	新型冠状病毒(2019-nCoV)双荧光qRT-PCR试剂盒	100次	999.00元
D8006M	新型冠状病毒(2019-nCoV)双荧光qRT-PCR试剂盒	500次	3999.00元

注意：本试剂盒并非临床诊断检测试剂盒，检测结果仅供科学研究用途，不得作为临床诊断的依据。但感兴趣的用户可以与碧云天合作，使用本试剂盒作为原料，研发和申报相应的临床诊断检测试剂盒。如有合作意向，可发送邮件至marketing@beyotime.com联系我们。

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